[发明专利]一种眼咽远端型肌病生物标记物和检测方法及其用途

权利要求书

1.GIPC1基因在制备诊断、检测或治疗眼咽远端型肌病的产品中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，GIPC1基因的5’UTR区域GGC或CGG序列发生动态突变。

3.一种眼咽远端型肌病生物标记物，其特征在于，包括权利要求1-2任一项中所述的GIPC1基因。

4.一种检测眼咽远端型肌病生物标记物的引物，其特征在于，所述引物是基于权利要求1或2中所述的GIPC1基因设计的。

5.根据权利要求4所述的引物，其特征在于，包括定性检测引物，如下(a)或(b):

(a)引物GIPC1-F：如SEQ ID NO.1所示；引物GIPC1-R:如SEQ ID NO.2所示；引物GIPC1-linker-R:如SEQ ID NO.3所示；

(b)引物GIPC1-F、引物GIPC1-R和/或引物GIPC1-linker-R的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加至少一个核苷酸；优选的，还包括定量检测引物，如下(c)或(d):

(c)引物GIPC1-AL-F：如SEQ ID NO.4所示；引物GIPC1-AL-R:如SEQ ID NO.5所示；

(d)引物GIPC1-AL-F和/或引物GIPC1-AL-R的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加至少一个核苷酸。

6.一种检测眼咽远端型肌病生物标记物的试剂盒，其特征在于，包括权利要求4或5所述的引物。

7.一种检测眼咽远端型肌病生物标记物的方法，其特征在于，包括利用权利要求4或5所述的引物或权利要求6所述的试剂盒进行PCR扩增。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，还包括定性检测PCR反应体系和/或定量检测PCR反应体系；所述定性检测PCR反应体系和/或定量检测PCR反应体系中均含有PrimeSTAR GXL DNA聚合酶、1×PrimeSTAR GXL缓冲液、dATP、dTTP、dCTP、7-Deaza-dGTP、二甲基亚砜和/或甜菜碱；

优选的，定性检测PCR反应体系，总反应体积为20μl：含有0.25U Prime STAR GXL DNA聚合酶，1×PrimeSTAR GXL缓冲液，200μM的dATP，200μM的dTTP，200μM的dCTP，200μM的7-Deaza-dGTP，体积百分比5％二甲基亚砜，1M甜菜碱，0.3μM引物GIPC1-F，0.3μM引物GIPC1-linker-R，0.1μM引物GIPC1-R和100ng基因组DNA；

优选的，定量检测PCR反应体系，总反应体积为20μl：含有0.25U Prime STAR GXL DNA聚合酶，1×PrimeSTAR GXL缓冲液，200μM的dATP，200μM的dTTP，200μM的dCTP，200μM的7-Deaza-dGTP，体积百分比5％二甲基亚砜，1M甜菜碱，0.3μM引物GIPC1-AL-F，0.3μM引物GIPC1-AL-R，和100ng基因组DNA。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，还包括定性PCR反应条件和/或定量PCR反应条件；所述定性检测PCR反应条件和/或定量检测PCR反应条件均为：98℃下反应10分钟；然后进行9个循环：98℃反应30秒，66℃反应15秒，每个循环下降1℃，72℃下反应4分钟；接着是28个循环：98℃反应30秒，58℃反应15秒，72℃反应4分钟；最后延伸步骤72℃，10分钟。

10.权利要求4-5任一项所述的引物或权利要求6所述的试剂盒在制备诊断、检测或治疗眼咽远端型肌病的产品中的用途。