[发明专利]一种亚临界水辅助酶法制备贝类高F值寡肽的方法

权利要求书

1.一种亚临界水辅助酶法制备贝类高F值寡肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）亚临界水处理：将贝类加工副产物匀浆，并与水混合，使用亚临界水进行萃取，过滤得萃取液；

2）酶解：对步骤1）获得的萃取液先使用内切蛋白酶进行酶解，再使用外切蛋白酶进行酶解，得酶解液；所述的内切蛋白酶为胃蛋白酶；

3）澄清：脱除步骤2）获得的酶解液中的固体颗粒，得澄清酶解液；

4）脱色：使用活性炭对步骤3）获得的澄清酶解液进行脱色，得脱色酶解液；

5）精制：将步骤4）获得的脱色酶解液先经过超滤，再经过纳滤，获得高F值寡肽滤液；对高F值寡肽滤液进行干燥；

其中，步骤2）的工作条件为：

a.第一步酶解：调节料液pH为2～3.5，按照步骤1）中贝类加工副产物匀浆后的质量计加入300～700 U/g酶活力单位的胃蛋白酶，调整料液的反应温度为35～45 ℃，在此反应条件下反应2～4 h，灭酶；

b.第二步酶解：调整料液的pH为6～8，按照步骤1）中贝类加工副产物匀浆后的质量计加入300～700 U/g酶活力单位的风味蛋白酶，调整料液的反应温度为45～60 ℃，在此反应条件下反应2～4 h，灭酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）中：

匀浆后的贝类加工副产物与水的质量比为1：（2～5）；

亚临界水萃取中，亚临界水的温度为110℃～170 ℃，压力为7～20 MPa，保温保压萃取20～60 min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）的工作条件为：将酶解液置于碟片式动态膜过滤机中过滤，得到澄清的酶解液；膜孔径为0.45μm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4）的工作条件为：活性炭与步骤3）获得的澄清酶解液的质量比为1：（10～20），调节pH5～7，温度25～40 ℃，反应时间2～3 h，过滤，得脱色酶解液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5）的工作条件为：

a.超滤去除大分子蛋白质：采用截留分子量为10000 Da的超滤膜超滤去除大分子蛋白；

b. 纳滤精制：采用分级纳滤，将超滤获得的滤液先通过截留分子量为5000 Da的纳滤膜，再通过截留分子量为1000 Da的纳滤膜，获得1000 Da以下的纳滤溶液；再通过截留分子量为200 Da纳滤膜，脱除盐与游离氨基酸；

c.干燥：采用冷冻干燥，获得高F值寡肽粉。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的贝类加工副产物为扇贝加工副产物。

7.一种高F值寡肽，其特征在于，使用如权利要求1～6任一项所述的方法获得。

8.根据权利要求7所述的高F值寡肽，其特征在于，其F值在35以上。