[发明专利]肠道病毒核酸检测的通用引物和探针以及试剂盒

权利要求书

1.肠道病毒核酸检测的通用引物与探针，其特征在于，包含有核苷酸序列如SEQ IDNo:1所示的上游引物，核苷酸序列如SEQ ID No:2所示的下游引物，以及核苷酸序列如SEQID No:3所示的探针，所述探针的5’端标记有 FAM 荧光染料，3’端标记有TAMRA 荧光染料。

2.一种肠道病毒核酸检测的通用试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括有用于扩增肠道病毒的特异基因位点的检测引物和配合使用的探针，所述检测引物的核苷酸序列如SEQ ID No:1 和 SEQ ID No:2 所示，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述探针的5’端标记有 FAM 荧光染料，3’端标记有TAMRA 荧光染料。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有核苷酸序列如SEQID No:4所示的阳性对照质粒。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有rRT-PCR 反应液，所述rRT-PCR 反应液与引物、探针共同构成rRT-PCR 检测体系；所述rRT-PCR 检测体系含有以下含量的各组分：25μl rRT-PCR 检测体系中含有：2×OneStep RT-PCR Buffer 12.5μl，10μM正向引物3.0μl，10μM反向引物 3.0μl，10μM探针 0.5μl，Rox Reference Dye Ⅱ(50×)0.5μl，5U/μl Ex Taq HS 0.5μl，40U/μl PrimeScript RT enzyme Mix 0.5μl，RNA4.5μl。

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸检测的反应条件为：50℃反转录20min，95℃反应3min，95℃ 变性15s，60℃退火/延伸40s，PCR扩增反应45个循环。

7.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述剂盒的检测对象为咽喉拭子液、泄殖腔拭子液、粪便或尿液。