[发明专利]核酸提取组合物及其应用,含有该核酸提取组合物的试剂、试剂盒有效
申请号: | 202010347016.5 | 申请日: | 2020-04-28 |
公开(公告)号: | CN111254141B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 陈翔;王磊;李素;郑隆堂;王亚南;文飞;辛娟;张闻天;程京 | 申请(专利权)人: | 博奥生物集团有限公司;四川大学华西医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘颖 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 提取 组合 及其 应用 含有 试剂 试剂盒 | ||
1.病毒核酸提取组合物,其特征在于,由结合液、清洗液、裂解液、加强剂、洗脱液组成;所述结合液为糖原、MOPS、多胺类物质、TCEP的组合物;所述清洗液为盐酸胍、醋酸钾、糖原、MOPS、多胺类物质的组合物;
所述结合液中糖原浓度为0.1%~1%(m/v);MOPS浓度为10mM~20mM;多胺类物质为精胺,浓度为0.1%~2%(m/v);TCEP浓度为5mM~50mM;
所述结合液的pH为8.5~10;
所述清洗液中盐酸胍浓度为0.05M~0.6M;醋酸钾浓度为0.05M~0.5M;糖原浓度为0.01%~0.1%(m/v);MOPS浓度为1mM~2mM;多胺类物质为精胺,浓度为0.01%~0.3%(m/v);
所述清洗液的pH为5~6;
所述裂解液为异硫氰酸胍、TritonX-100的混合物;
所述加强剂为蛋白酶k、海藻糖、氯化钙的混合物;
所述裂解液中异硫氰酸胍浓度为2M~8M;TritonX-100浓度为5%~20%(v/v);pH值为3~6;
所述加强剂中蛋白酶k浓度为10mg/ml~25mg/ml;海藻糖浓度为3%~12%(m/v);氯化钙浓度为5mM~20mM;
所述洗脱液用氢氧化钠调节1×TE溶液的pH值为8~10;
不包括挥发性有机溶剂。
2.如权利要求1所述的病毒核酸提取组合物在制备病毒核酸提取和/或病毒核酸检测的工具中的应用;所述工具包括试剂和/或试剂盒。
3.病毒核酸提取试剂或病毒核酸检测试剂,其特征在于,包括如权利要求1所述的病毒核酸提取组合物以及检测中可接受的试剂。
4.病毒核酸提取试剂盒或病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的病毒核酸提取组合物或如权利要求3所述的病毒核酸提取试剂或病毒核酸检测试剂以及检测中可接受的试剂或载体。
5.如权利要求4所述的病毒核酸提取试剂盒或病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述载体包括硅基吸附柱、磁珠、玻璃珠、壳聚糖或二氧化硅修饰的载体。
6.用于非诊断目的的病毒核酸提取方法或病毒核酸检测方法,其特征在于,取待测样本与如权利要求1所述的病毒核酸提取组合物或如权利要求3所述的病毒核酸提取试剂或病毒核酸检测试剂混合,提取和/或检测。
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