[发明专利]一种新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测引物组合物及试剂盒

权利要求书

1.一种新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测的引物组合物，其特征在于，包括：

新型冠状病毒2019-nCOV ORFab1基因的引物和探针：

2019-nCOV ORFab1基因上游引物ORF-F：ATAGTGGGTGATGTTGATCGAGAG；

2019-nCOV ORFab1基因下游引物ORF-R：ACTGTCCTCAAAGCTGTCGCT；

2019-nCOV ORFab1基因探针ORF-P：CACTAGCCTTATTAGTAGGTATAGCCATAGC；

其中5′端标记FAM荧光报告基团，3′端标记BHQ1荧光淬灭基团；

新型冠状病毒2019-nCOV的N基因的引物和探针：

2019-nCOV N基因上游引物NF：CTCCTGCTATCAATCCTGCTAT；

2019-nCOV N基因下游引物NR：CTGCAGTTGAATATCTTGAACTGAT；

2019-nCOV N基因探针NP：TTGACTGCGGCCTCTCCTCGCTT；

其中5′端标记ROX荧光报告基团，3′端标记BHQ2荧光淬灭基团。

2.一种新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，包括：

核酸提取试剂、核酸扩增反应液、酶混合液、阴性对照和阳性对照，

所述核酸扩增反应液包括无核酸酶水、2×PCR Buffer Mix、MgCl₂、dNTPs、ORFab1基因引物探针、N基因的引物探针和内标基因HBB的引物探针，

其中，新型冠状病毒2019-nCOV ORFab1基因的引物探针包括：

2020-nCOV ORFab1基因上游引物ORF-F：ATAGTGGGTGATGTTGATCGAGAG；

2019-nCOV ORFab1基因下游引物ORF-R：ACTGTCCTCAAAGCTGTCGCT；

2019-nCOV ORFab1基因探针ORF-P：CACTAGCCTTATTAGTAGGTATAGCCATAGC；

其中5′端标记FAM荧光报告基团，3′端标记BHQ1荧光淬灭基团。

3.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

所述核酸提取试剂包括含异硫氰酸胍和TritonX-100的裂解液和含高氯酸钠、醋酸盐和乙醇的洗脱液。

4.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

dNTPs包括：100mM dATP、100mM dGTP、100mM dCTP和50mM dUTP。

5.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

所述阴性对照为灭菌生理盐水。

6.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

所述阳性对照为含有ORF1ab1基因假病毒、N基因假病毒和HBB基因假病毒的灭菌生理盐水。

7.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

2019-nCOV N基因上游引物NF：CTCCTGCTATCAATCCTGCTAT；

2019-nCOV N基因下游引物NR：CTGCAGTTGAATATCTTGAACTGAT；

2019-nCOV N基因探针NP：TTGACTGCGGCCTCTCCTCGCTT；

其中5′端标记ROX荧光报告基团，3′端标记BHQ2荧光淬灭基团。

8.如权利要求2所述的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于：

所述酶混合液包括1U/μL的反转录酶和5U/μL耐热DNA聚合酶。