[发明专利]传染性脾肾坏死病毒、大口黑鲈鱼病毒和鳜弹状病毒的三重荧光PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种组合物，包括引物组和探针；

所述引物组，包括：检测传染性脾肾坏死病毒的第一引物，所述第一引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1～2所示的引物对；检测鳜弹状病毒的第二引物，所述第二引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:4～5所示的引物对；检测大口黑鲈鱼病毒的第三引物，所述第三引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:7～8所示的引物对；

所述探针，包括：检测传染性脾肾坏死病毒的第一探针，所述第一探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；检测鳜弹状病毒的第二探针，所述第二探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；检测大口黑鲈鱼病毒的第三探针，所述第三探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述探针为自身猝灭探针，其5’端标记有荧光发射基团，3’端标记有荧光猝灭基团。

3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述荧光发射基团选自FAM、HEX、ROX、CY5、VIC和JOE；所述荧光猝灭基团选自BQ1、BQ2、TAMRA和MGB。

4.一种试剂盒，包含权利要求1～3中任一项所述的组合物中的引物组和探针。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含阳性标准品、阴性标准品、Taq酶、反转录酶、RNA酶抑制剂、反应缓冲液、dNTP、无核酸酶水和冻干保护剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述Taq酶浓度为：1-10U/反应体系；所述反转录酶浓度为：5-20U/反应体系；所述RNA酶抑制剂浓度为：20-80U/反应体系；所述dNTP浓度为：0 .5-5mM；所述引物和所述探针浓度为：0.2-1μM；所述冻干保护剂的浓度为5％-10％m/v；其中，所述反应体系的体积为25μL。

7.根据权利要求4至6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中，除阴性标准品外，其它组分均为冻干形式。