[发明专利]一种静注COVID-19人免疫球蛋白的制备方法

权利要求书

1.一种静注COVID-19人免疫球蛋白的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)血浆原料包括：COVID-19康复者恢复期血浆、或经新型冠状病毒疫苗(SARS-CoV-2疫苗)免疫后的健康人血浆、或经病毒灭活后的康复血浆或免疫血浆；

(2)低温乙醇法梯度处理灭活血浆得组分Ⅱ沉淀；

(3)组分Ⅱ沉淀溶解、精制过滤后超滤；

(4)超滤液经配置、除菌过滤后得COVID-19人免疫球蛋白原液；

(5)所述人免疫球蛋白原液依次经低pH孵放、纳滤、除菌过滤后，分装即得所述静注COVID-19人免疫球蛋白；

步骤(2)所述低温乙醇法梯度处理灭活血浆得组分Ⅱ沉淀的步骤如下：

1)醋酸缓冲液调整血浆pH值至5.97±0.50，缓慢加入95％乙醇至乙醇浓度20％，乙醇处理温度控制在-4.0±2.0℃，搅拌至少2小时，处理完毕后以小于0.2MPa压滤得组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀和组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ上清，其中组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ上清经处理后废弃或冻存以备用；

2)用组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀重量10～30倍注射用水的溶解并稀释组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀，调整pH至5.30±0.50，缓慢加入95％乙醇，至乙醇浓度14％，乙醇处理反应温度控制在-2.0±2.0℃，搅拌至少2小时，反应完毕后以小于0.2MPa的压力压滤，压滤后的上清为组分Ⅰ+Ⅲ上清，沉淀为组分Ⅰ+Ⅲ沉淀，其中组分Ⅰ+Ⅲ沉淀经处理后废弃；

3)加入组分Ⅰ+Ⅲ上清重量的1/40～1/60的1mol/L氯化钠溶液量，用1mol/L碳酸氢钠调整pH至7.20±0.50，缓慢加入95％乙醇，至乙醇浓度25％，乙醇处理反应温度控制在-6.0±2.0℃，搅拌至少2小时，反应完毕后以小于0.2MPa的压力压滤，压滤后沉淀为组分Ⅱ沉淀，上清为组分Ⅱ上清，组分Ⅱ上清经处理后废弃；

步骤(3)所述的组分Ⅱ沉淀溶解、精制过滤后超滤的步骤为：

1)用组分Ⅱ沉淀的3至10倍量的注射用水使组分Ⅱ沉淀充分溶解，用1mol/L HCL调整至pH 4.1±0.3，随后反应液温度控制控制在0～4℃内，搅拌至少2小时，用深层滤器控制滤过压力小于0.2MPa的条件下过滤，收集澄清液；

2)选用孔径30kD或50kD的超滤膜，用5～10个制品体积的注射用水进行超滤透析，超滤液温度控制在0～15℃，超滤后控制蛋白含量在50～60g/L，pH控制在4.1±0.3。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，调整血浆pH值时，醋酸缓冲液的添加速度为：每千克血浆2ml/分钟。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述的超滤液经配置、除菌过滤后得COVID-19人免疫球蛋白原液的步骤为：

1)原液配制：在超滤后滤液中加入麦芽糖，麦芽糖含量为90～110g/L；

2)蛋白原液除菌过滤后制品即为COVID-19人免疫球蛋白原液。

4.权利要求1-3任一所述的静注COVID-19人免疫球蛋白的制备方法制备获得的抗COVID-19病毒的人免疫球蛋白产品。