[发明专利]一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株的应用

说明书

本发明公开一种白念珠菌减毒菌株，所述白念珠菌减毒菌株为HOF1基因不表达的白念珠菌hof1/hof1缺失株。本发明还公开一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用，所述白念珠菌治疗药物可以通过RNA干扰或者基因重组的方法使HOF1基因不表达制得；或者通过制备HOF1蛋白拮抗剂，使HOF1基因表达的蛋白不发挥作用的方法制得。本发明另外还公开一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株在毒力调控方面的应用，包括以下步骤：检测HOF1基因缺失对白念珠菌在宿主细胞内存活的影响情况；检测HOF1缺失的白念珠菌毒性情况；检测HOF1基因对白念珠菌在内脏定植的影响。本发明为治疗白念珠菌感染提供了新的药剂和方向。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株的应用，具体涉及一种白念珠菌减毒菌株、一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用、一种缺失HOF1基因的白念珠菌减毒菌株在毒力调控方面的应用。

背景技术

白念珠菌（Candida albicans）是一种最重要的人体病原真菌，广泛存在于正常人口腔、呼吸道、肠道及阴道，一般不致病或仅引起轻微的皮肤或粘膜等浅部感染；而当机体免疫功能下降或正常菌群相互制约失调时，其致病能力增强可引起急性、亚急性或慢性侵袭性真菌感染，造成血液系统、呼吸系统等出现深度重症乃至死亡。据统计，白念珠菌导致的侵袭性感染占所有念珠菌感染的40%以上（Chen M, etal., 2018）。当前，免疫受损人群不断增加、临床抗真菌药物的局限性和真菌耐药性问题依然突出（Fisher M C, etal.,2018），导致白念珠菌仍是威胁人类健康的重要真菌病原。

白念珠菌致病机理主要包括菌体形态转换、黏附素、侵袭酶等（Sellam A, etal.,2016）。其中，菌体形态转换对于致病有重要意义：白念珠菌的菌丝态对于细胞逃逸宿主免疫细胞的吞噬和杀伤，以及侵入深部组织有重要作用，因而具有更强的致病能力；相反，若抑制菌丝的生成，则可显著降低其细胞毒力。但近期还发现白念珠菌DNA损伤应答途径，参与调控形态转换和抵抗宿主的固有免疫，预示着与致病过程存在密切联系。

在人体内，固有免疫是抵抗病原体感染的第一道防线，巨噬细胞和中性粒细胞吞噬入侵病原体，产生的活性氧（ROS）可损伤其DNA而杀伤入侵病原体。所以正确和及时地感应并修复损伤DNA的能力，对于病原体在宿主内的定植和致病有重要意义，如研究发现ROS可对入侵的白念珠菌造成DNA损伤胁迫并激活其检验点激酶Rad53（Dantas Ada S, etal.,2015）；而缺乏超氧化物歧化酶或过氧化氢酶（SOD5、CTA1）会导致白念珠菌对巨噬细胞抵抗能力减弱，系统感染中的毒力下降（da Rosa J L, etal., 2013；Li C X, etal., 2015）。此外，新型隐球酵母检验点激酶Rad53和Chk1（Jung K W, etal., 2015）也被报道参与毒力调控。