[发明专利]一种头孢类抗生素的液相色谱-质谱联用的检测方法

说明书

本发明涉及一种头孢类抗生素的液相色谱‑质谱联用的检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)样品预处理：将一定量的水样通过离心机去除悬浮物，然后抽滤，再调节水样pH；(2)样品萃取：先淋洗萃取柱进行活化，再向水样中加入螯合剂并充分混合，再将水样通过萃取柱，过样后的萃取柱冲洗，接着干燥、洗脱，收集洗脱液并吹至近干，得到残渣；(3)质谱检测：溶解残渣得到待检测液，将待检测液在一定梯度洗脱条件和质谱检测条件下进行检测。与现有技术相比，本发明具有操作简单，专属性强，准确度高，耐受性好，仪器灵敏度高等优点。

技术领域

本发明涉及环境分析领域，尤其是涉及一种头孢类抗生素的液相色谱-质谱联用的检测方法。

背景技术

液相色谱-质谱联用是两种技术的结合，将高效分离和结构鉴定合为一体，成为复杂混合物中痕量组分定性和定量的有力工具。

液相色谱以液体为流动相，特别适合高沸点大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析，更适用于许多药物的分析，如具有热不稳定性的四环素类。过去的几十年科技的发展更是促进了液相质谱联用技术的发展，液质联用是分离技术和定性技术的联用，一方面液相色谱具有高速高效的分离能力和灵敏度，但是其仅显示色谱峰和保留值，不能提供被测组分的结构信息或对未知化合物进行结构鉴定，难以对组分做出定性判断，另一方面质谱利用很强的结构鉴定能力，但自身不具备分离能力。将这两种技术结合就互为补充，分析不同性质的化合物。

水体中头孢类抗生素检测面临以下难点：(1)水体中抗生素残留浓度低,多数在μg/L或ng/L量级；(2)水体中残留的抗生素不止一种，需要开发同时检测多种的方法，减少采样量并节省时间；(3)水体中杂质会干扰抗生素的检测，降低方法的灵敏度。随着实际水样的日益杂化，以及水样中头孢类抗生素的种类增多，近年来需要使用更低的方法定量限、单次可同时检测更多的头孢类抗生素种类的方法。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种解决水体中头孢类抗生素浓度低，水体中杂质多，无法同时测量多种抗生素的头孢类抗生素的液相色谱-质谱联用的检测方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种头孢类抗生素的液相色谱-质谱联用的检测方法，该方法包括以下步骤：

(1)样品预处理：将一定量的水样通过离心机去除悬浮物，然后抽滤，再调节水样pH；

(2)样品萃取：先淋洗萃取柱进行活化，再向水样中加入螯合剂并充分混合，再将水样通过萃取柱，过样后的萃取柱冲洗，接着干燥、洗脱，收集洗脱液并吹至近干，得到残渣；

(3)质谱检测：溶解残渣得到待检测液，将待检测液在一定梯度洗脱条件和质谱检测条件下进行检测。

进一步地，步骤(1)中所述的离心机转速为4000-8000rpm；抽滤采用孔径0.2-0.5μm玻璃纤维滤膜抽滤；所述的调节水样pH，采用0.5M的盐酸调节，调节pH的范围为pH＝1.5-5.5，优选2.5-4.5，更优选2.5。

进一步地，步骤(2)中所述的活化，是采用等体积的甲醇和超纯水淋洗萃取柱进行活化；所述的螯合剂包括Na₂EDTA，水样与螯合剂的体积比为(40-60):1；水样以2-10ml/min的流速通过萃取柱。

进一步地，步骤(2)中所述的冲洗，是采用超纯水冲洗，所述的干燥，是在氮气保护下干燥10-30min；所述的洗脱液为甲醇和水以体积比为(60-100):(0-40)的混合液体，洗脱液的用量为水样体积的0.4-1.2％，所述的吹至近干，是在氮气保护下吹至近干。

进一步地，步骤(3)中所述的溶解残渣，是采用水样体积1/1000的甲醇进行溶解。

进一步地，步骤(3)中所述的梯度洗脱条件为：