[发明专利]一种阿莫西林中戊二醛的检测方法

说明书

本发明涉及一种高效液相色谱法测定阿莫西林中戊二醛的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱，流动相为水：乙腈。该方法出峰时间适宜，峰型较好，专属性较强，操作简单，解决了阿莫西林中戊二醛残留的检测问题，从而保证了生产过程中阿莫西林原料及制剂的质量可控。

技术领域

本发明涉及一种衍生化方法测定阿莫西林中基因毒性杂质戊二醛的方法，尤其是涉及一种高效液相色谱方法测定阿莫西林中戊二醛的方法。

背景技术

阿莫西林(Amoxicillin)是一种带有氨基侧链的青霉素，其化学结构在氨苄西林(Ampicillin，AMP)的侧链苯环上多一个羟基，其主要起抗菌作用的基本结构是6-氨基青霉烷酸中的β-内酰胺环，可专一性地与细菌内膜上的靶点结合，抑制细菌细胞壁黏肽合成酶的活性，从而阻碍细胞壁黏肽的合成，使细菌的细胞壁缺损，菌体膨胀破裂。是目前应用较为广泛的口服青霉素之一，其制剂有胶囊、片剂、颗粒剂等等。

阿莫西林化学结构式为：

本品为白色至类白色结晶性粉末，微溶于水和甲醇，其中文化学名：(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-[(R)-(-)-2-氨基-2-(4-羟基苯基)乙酰氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸三水合物。

阿莫西林的合成方法多种多样，大致可以分成化学合成法和酶促合成法，因为酶促合成法不仅可以减少反应步骤，而且可以减少废弃物的产生，有利于保护环境和降低生产成本，产品质量优异，所含杂质少，因此酶促反应是必然趋势，已进行了大规模生产化，酶生产过程中使用的戊二醛，属于基因毒性杂质，在阿莫西林原料中也是必然需要研究的杂质，暂无文献报道关于阿莫西林中戊二醛检测的方法。

发明内容

为严格控制产品质量，通过研究，建立了能够检测阿莫西林中戊二醛的杂质的方法。本发明的方法能够检测阿莫西林中的戊二醛并进行准确定量，具有分析时间短、分离度高、峰型好、操作简单、节约能耗等优点，解决了阿莫西林中戊二醛检测的问题，从而保证了生产过程中阿莫西林原料及其制剂的质量可控。

本发明的目的是这样实现的：一种阿莫西林中戊二醛的检测方法，其特征在于：

称取阿莫西林置于量瓶中，分别加入衍生化试剂和高氯酸溶液，进行衍生化反应，用乙腈溶液稀释定容即得供试品溶液，以水-乙腈为流动相，将上述供试品溶液注入高效液相色谱仪中检测，计算主峰面积从而确定戊二醛的含量。

进一步地，本发明的一种阿莫西林中戊二醛的检测方法，优化如下：

所述的流动相组成为水:乙腈的体积比为25-35:75-65；优选地，所述的流动相组成为水:乙腈的体积比为35:65、30:70、25:75。

所述的高效液相色谱仪中柱温为25-35℃，优选地为30℃。

所述的流动相流速为1.0-1.4mL/min，优选地为1.0、1.2、1.4mL/min。

所述的高效液相色谱仪中紫外检测波长为360nm。

所述的供试品溶液中阿莫西林的浓度为15-25mg/mL，优选地为20mg/mL。

所述的衍生化试剂为2,4-二硝基苯肼溶液，所述的衍生化试剂的加入量为衍生化试剂占供试品溶液的体积比为20％-40％，优选地为20％、30％、40％。

所述的高氯酸溶液为体积比30％高氯酸溶液，所述的高氯酸溶液的加入量为高氯酸溶液占供试品溶液的体积比为5％-20％。

所述的衍生化的温度为室温至60℃，优选地为室温、40℃、60℃。

所述的衍生化的时间为10-40min，优选地为10min、20min、30min、40min。