[发明专利]Ⅱ型胶原和透明质酸复合凝胶液及制备方法和用途

说明书

本发明提供了一种含有II型胶原和透明质酸的复合凝胶液，其特征在于，该复合凝胶液包括II型胶原、透明质酸和平衡物质；其中，所述平衡物质包括NaH₂PO₄‑Na₂HPO₄体系、Tris‑HCl体系、Tris‑马来酸体系或HEPES体系，以及包括NaCl和/或KCl；该复合凝胶液的pH为6.5‑7.5。本发明还提供了含有II型胶原和透明质酸的复合凝胶液的制备方法。本申请提供的复合凝胶液在生理pH值范围内，II型胶原和透明质酸能够以任意比例互溶，而且体系稳定，长时间放置也不会出现沉淀或变性；而且该复合凝胶液的渗透压和张力均适于生理体系。本发明提供的含有II型胶原和透明质酸的复合凝胶液的制备方法非常简单，成本低廉，易于大规模生产。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种含胶原和透明质酸的复合凝胶液及该复合凝胶液的制备方法，以及该复合凝胶液在制备软骨损伤修复用的药物中的用途。

背景技术

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是世界上最常见的中老年人慢性顽疾，发病率高，且有提早发病的趋势并随年龄增长而增高。引发OA的病因复杂多样，通常采用一 般性的临床处置、药物和手术等疗法，目前尚无有效的临床控制手段。软骨组织主要 成份是丰富的细胞外基质，主要由Ⅱ型胶原形成固态纤维网络，液态的透明质酸 (Hyaluronic acid，HA)填充其间，二相系统形成软骨陷窝，保护生长在其中的软骨 细胞发挥正常的生物学功能。OA病理状态下，大量软骨基质损失，软骨细胞缺乏保 护而失活，表型丢失逐渐形成纤维化软骨，进而丧失关节功能。

临床上最常用的透明质酸钠注射剂于1974年开始作为粘性补充剂，用于临床骨关节炎治疗，具有增加关节液粘稠性、保护关节软骨及润滑等作用，对各类型骨关节 炎及各类骨科术后均有一定的辅助治疗效果，至今仍广泛应用。由于HA仅为软骨 基质的单一成份，作用有限。随后的研究是制备更有效的复合粘性补充剂，其中Ⅱ型 胶原与HA是最理想的仿生软骨基质复合材料。但是，由于这两种物质本身的性质 限制了Ⅱ型胶原与HA复合剂的研究进展：HA在体内以酸的形式存在，而现有提取 方法由于工艺上的限制只能得到HA的盐类产品；胶原与HA二者带相反电荷，在 液体状态下极易形成聚合物而产生沉淀。现有专利与文献报道的方法包括将二者在 使用前分开保存，使用时再混合在一起，如CN201310099817.4所述；但是这种方法 仍然没有解决二者混合时产生沉淀的问题。CN200910041033.X报道采用电化学处理 的方法去除HA中的钠盐，之后再将透析后的HA溶液与胶原溶液混合，从而获得 含有HA溶液与胶原的溶液；但是这种方法耗时长、生产成本高。

关节软骨细胞表型分子调控与关节功能密切相关，在延缓或逆转骨关节炎进程中使软骨组织再生、软骨细胞具备旺盛分泌与活性功能是治疗的关键。软骨缺血、缺 氧的生理组织结构特征使其对损伤的反应与修复严重依赖于局部软骨细胞的应答与 代谢活动。如果仿生粘性补充剂含有具有促进软骨细胞活性的药物或生长因子，这 将更有效促进损伤软骨修复、更有效地防治OA。

发明内容

针对现有技术中存在的主要问题，本发明提供一种II型胶原和透明质酸相溶并保持活性的复合凝胶液，该复合凝胶液制备简单，成本低，体系稳定，能够直接应用

因此，一方面，本发明提供了一种含有II型胶原和透明质酸的复合凝胶液，其 特征在于，该复合凝胶液包括II型胶原、透明质酸和平衡物质；其中，所述平衡物 质包括NaH₂PO₄-Na₂HPO₄体系、Tris-HCl体系、Tris-马来酸体系或HEPES体系，以 及包括NaCl和/或KCl；该复合凝胶液的pH为6.5-7.5。

另一方面，本发明提供了所述复合凝胶液在制备软骨损伤修复用的药物中的用途。

另一方面，本发明提供了一种制备含有II型胶原和透明质酸的复合凝胶液的方法，其中，该方法包括以下步骤：