[发明专利]一种快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒

权利要求书

1.一种快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于，包括：

PCR反应液、Taq/UDG酶混合液、阳性对照和阴性对照，

PCR反应液包括10×PCR buffer、沙眼衣原体CT的引物和探针、淋球菌NG的引物和探针、解脲脲原体UU的引物和探针、人β-珠蛋白HBB的引物和探针、25mM MgCl₂、dNTPs和无菌蒸馏水，

沙眼衣原体CT的引物和探针、淋球菌NG的引物和探针、解脲脲原体UU的引物和探针和人β-珠蛋白HBB的引物和探针如下：

沙眼衣原体CT上游引物CF：5′-CCGTCGATCATAAGGCTTGGT-3′；

沙眼衣原体CT下游引物CR：5′-AGTATTTGCCGCTTTGAGTTCTG-3′；

沙眼衣原体CT探针CP：5′-ATTCCCCACAGGCAGAGCTTGCAA-3′；

其中5′端标记第一荧光报告基团，3′端标记第一荧光淬灭基团；

淋球菌NG上游引物NF：5′-GGTGTGGAAGGCAGGAACAT-3′；

淋球菌NG下游引物NR：5′-GCCTTAGTAACTGTATTGCCCGTTT-3′；

淋球菌NG探针NP：5′-AGTTGACCGAGCCACCCTCAGAAGGT-3′；

其中5′端标记第二荧光报告基团，3′端标记第二荧光淬灭基团；

解脲脲原体UU上游引物UF：5′-GCAGCCCTCTATCCGAACTG-3′；

解脲脲原体UU下游引物UR：5′-GCAAACGTGCTACAATGGCTAAT-3′；

解脲脲原体UU探针UP：5′-CGCTTCATCTTACGATTTTGCAGCAGTTTG-3′；

其中5′端标记第三荧光报告基团，3′端标记第三荧光淬灭基团；

人β-珠蛋白上游引物HF：5′-TGAAGGCTCATGGCAAGAAAGT-3′；

人β-珠蛋白下游引物HR：5′-TTGTCACAGTGCAGCTCACTCA-3′；

人β-珠蛋白探针HP：5′-ACAACCTCAAGGGCACCTTTGCCAC-3′；

其中5′端标记第四荧光报告基团，3′端标记第四荧光淬灭基团；

第一荧光报告基团、第二荧光报告基团、第三荧光报告基团和第四荧光报告基团分别为不同的荧光报告基团，

所述Taq/UDG酶混合液包括5U/μL耐热DNA聚合酶和1U/μL尿嘧啶DNA糖基化酶。

2.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

阴性对照为1×TE缓冲液。

3.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

阳性对照为含有沙眼衣原体CT、淋球菌NG、解脲脲原体UU、和人β-珠蛋白的线性化重组质粒的1×TE缓冲液。

4.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

其中沙眼衣原体CT探针的5′端标记FAM荧光报告基团，3′端标记BHQ1荧光淬灭基团。

5.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

其中淋球菌NG探针的5′端标记JOE荧光报告基团，3′端标记BHQ1荧光淬灭基团。

6.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

解脲脲原体UU探针的5′端标记CY5荧光报告基团，3′端标记BHQ2荧光淬灭基团。

7.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

人β-珠蛋白HBB探针的5′端标记ROX荧光报告基团，3′端标记BHQ2荧光淬灭基团。

8.如权利要求1所述的快速检测泌尿生殖道病原体的试剂盒，其特征在于：

判断标准为：PCR扩增试剂中Ct值≤40，依据荧光通道具体判断病原体为阳性；Ct40时，依据荧光通道具体判断病原体为阴性。