[发明专利]G-17、PGI、PGII联合检测装置及其制备方法

权利要求书

1.一种G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于，所述G-17、PGI、PGII联合检测装置的结构是：样品垫（1）、免疫胶体金玻璃纤维膜（2）、免疫硝酸纤维素膜（3）、吸收垫（4）分别粘贴在塑料板（5），所述免疫硝酸纤维素膜（3）的两端分别与吸收垫（4）、免疫胶体金玻璃纤维膜（2）搭接，所述免疫胶体金玻璃纤维膜（2）的另一端与样品垫（1）搭接；所述免疫硝酸纤维素膜（3）上设置第一检测线T1、第二检测线T2、第三检测线T3和质控线C；所述的第一检测线T1上固相有高特异性胃泌素17抗体；所述的第二检测线T2上固相有高特异性胃蛋白酶原抗体；所述的第三检测线T3上固相有高特异性胃蛋白酶原抗体；所述免疫硝酸纤维素膜（3）上设置的检测线T1、T2、T3纵向排列在同一条免疫硝酸纤维素膜（3）上，形成一个联合检测装置；或者所述免疫硝酸纤维素膜（3）上设置的检测线T1、T2、T3分别设置在三条免疫硝酸纤维素膜（3）上，并列排列形成一个联合检测装置；所述的质控线C上喷点羊抗鼠IgG多克隆抗体；所述制备方法，包括下列步骤：

（a）采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金；

（b）采用步骤（a）中制得的胶体金标记胃泌素 17、胃蛋白酶原、胃蛋白酶原抗体，获得免疫胶体金；

（c）采用喷金缓冲液稀释步骤（b）的免疫胶体金获得免疫胶体金溶液，用免疫胶体金溶液喷涂于玻璃纤维垫，制得免疫胶体金玻璃纤维膜；

（d）将硝酸纤维素膜用聚乙二醇丙三醇处理液预处理后，喷点与油酸修饰的硫化锌纳米颗粒结合的胃泌素 17、胃蛋白酶原、胃蛋白酶原抗体作为检测线，喷点羊抗鼠IgG抗体作为质控线，制得免疫硝酸纤维素膜；

（e）将预处理的样品垫、步骤（c）制备的免疫胶体金玻璃纤维膜、步骤（d）制备的免疫硝酸纤维素膜、吸水纸依次粘贴在胶板上，切裁制得检测试剂条，最后将检测试剂条装入塑料外壳。

2.根据权利要求1所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（a）所述的采用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金颗粒粒径为20~60nm。

3.根据权利要求1所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（c）所述的喷金缓冲液由Tris-HCL液、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白BSA组成，pH值8.5，其中Tris-Hcl浓度为0.02mol/L，蔗糖浓度为5~20%，海藻糖浓度为1~5%，牛血清白蛋白BSA浓度为0.5~1% 。

4.根据权利要求1所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（d）所述的将硝酸纤维素膜用聚乙二醇丙三醇处理液预处理是：用聚乙二醇丙三醇处理液浸泡硝酸纤维素膜1h，并慢速振荡摇晃，取出后用蒸馏水清洗3遍，最后在真空干燥箱中干燥；

步骤（d）所述的油酸修饰的硫化锌纳米颗粒分别结合胃泌素 17、胃蛋白酶、胃蛋白酶抗体是：以油酸修饰的 ZnS作为载体，取 1 mL 胃泌素 17、胃蛋白酶、胃蛋白酶抗体溶液，搅拌1小时后，分别以12000 rpm，8500 rpm和7000 rpm离心10分钟收集，去离子水各洗2遍。

5.根据权利要求1或4所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（d）所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇稀释到浓度为0.5%组成，经0.22μm滤膜过滤，备用。

6.根据权利要求1或4所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（d）所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇和多聚赖氨酸混合组成，其中聚乙二醇丙三醇浓度为0.5%，多聚赖氨酸浓度为0.5%，经0.22μm滤膜过滤，备用。

7.根据权利要求1或4所述的G-17、PGI、PGII联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤（d）所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇、多聚赖氨酸、PEG20000混合组成，其中聚乙二醇丙三醇浓度为0.5%，多聚赖氨酸浓度为0.5%，PEG20000浓度为0.1%，经0.22μm滤膜过滤，备用。