[发明专利]一种检测新型冠状病毒和流感病毒的试剂盒有效

专利信息
申请号: 202010370223.2 申请日: 2020-05-06
公开(公告)号: CN111254228B 公开(公告)日: 2020-09-11
发明(设计)人: 周科隆;仁青措;张华;曹渊;王晓楠;熊磊;陈才夫 申请(专利权)人: 上海思路迪医学检验所有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 北京市兰台律师事务所 11354 代理人: 张峰
地址: 200120 上海市浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 新型 冠状病毒 流感病毒 试剂盒
【权利要求书】:

1.引物探针组合物,其特征在于,包括选自如下的任意两种以上引物探针组:

用于检测新型冠状病毒ORF1ab基因的引物探针组A,所述引物探针组A包括SEQ IDNO.1所示的正向引物,SEQ ID NO.2所示的反向引物,SEQ ID NO.3所示的探针;

用于检测新型冠状病毒S基因的引物探针组B,所述引物探针组B包括SEQ ID NO.4所示的正向引物,SEQ ID NO.5所示的反向引物,SEQ ID NO.6所示的探针;

用于检测新型冠状病毒N基因的引物探针组C,所述引物探针组C包括SEQ ID NO.7所示的正向引物,SEQ ID NO.8所示的反向引物,SEQ ID NO.9所示的探针;

用于检测新型冠状病毒E基因的引物探针组D,所述引物探针组D包括SEQ ID NO.10所示的正向引物,SEQ ID NO.11所示的反向引物,SEQ ID NO.12所示的探针;

可选的,所述引物探针组合物还包括用于检测流感病毒A的引物探针组E,所述引物探针组E包括SEQ ID NO .13所示的正向引物,SEQ ID NO.14所示的反向引物,SEQ ID NO.15所示的探针;

可选的,所述引物探针组合物还包括用于检测流感病毒B的引物探针组F,所述引物探针组F包括SEQ ID NO.16所示的正向引物,SEQ ID NO.17所示的反向引物,SEQ ID NO.18所示的探针;

所述引物探针组合物还包括用于检测内标的引物探针组G,所述引物探针组G包括SEQID NO.19所示的正向引物,SEQ ID NO.20所示的反向引物,SEQ ID NO.21所示的探针。

2.一种用于病毒检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物探针组合物。

3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针组合物包括如SEQ ID NO.1~6所示的引物探针组。

4.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针组合物包括如SEQ ID NO.1~6和SEQ ID NO.13~21所示的引物探针组。

5.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针组合物包括如SEQ ID NO.1~3和SEQ ID NO.7~12所示的引物探针组。

6.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针组合物包括如SEQ ID NO.1~3和SEQ ID NO.7~21所示的引物探针组。

7.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述引物在PCR反应体系中的终浓度之和在50~500 nM之间,所述探针在PCR反应体系中终浓度之和在25~250nM之间。

8.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括Tris缓冲液、镁离子、dA/G/C/UTPs、DNA聚合酶、逆转录酶、UNG酶。

9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品。

10.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述新型冠状病毒和/或流感病毒的样本来源于人鼻咽拭子、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、粪便样本或环境样本。

11.如权利要求1所述的引物探针组合物在制备通过如下方法检测新型冠状病毒和/或流感病毒的试剂盒中的应用,其特征在于,所述方法包括:

样本采集、病毒核酸提取、核酸扩增、结果判定;

所述结果判定包括在核酸扩增步骤得到的扩增曲线上的指数扩增阶段设定阈值,得到对应的Ct值,根据Ct值判定病毒核酸检测结果;

其中对于新型冠状病毒核酸检测结果的判定是同一核酸扩增反应体系中针对新型冠状病毒至少两个靶基因的核酸扩增得到的两个Ct值综合判定。

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