[发明专利]一种检测新型冠状病毒和流感病毒的试剂盒

说明书

本发明公开了一种可同时检测新型冠状病毒和流感病毒的试剂盒。具体的，本发明公开的试剂盒包括分别靶向新型冠状病毒S基因、E基因、N基因和/或ORF1ab基因的引物探针，以及靶向流感病毒A/B特征性保守序列的引物探针，可用于体外定性检测新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者的鼻咽拭子、痰液等样本中的新型冠状病毒RNA，同时检测样本中的流感病毒A/B RNA辅助排除疑似病例，可用于对新型冠状病毒感染的鉴别诊断，灵敏度高，使用方便。

技术领域

本发明涉及分子生物学检测技术，特别是涉及及一种检测新型冠状病毒和/或流感病毒的检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

自2019年12月以来，确诊了多例不明原因病毒性肺炎患者。此类病例由一种新发现的冠状病毒引起，被称为2019新型冠状病毒，其属于乙型冠状病毒，2019新型冠状病毒（COVID-19）属于乙型冠状病毒属病毒，是人类历史上确定的第7种可感染人的冠状病毒(HCoV)，其基因特征与SARS-CoV和MERS-CoV有明显区别。2020年2月11日，国际病毒分类委员会（ICTV）宣布，2019新型冠状病毒的分类名为严重急性呼吸综合证冠状病毒2（SARS-Cov-2），同日世界卫生组织（WHO）将这一病毒感染导致的疾病正式命名为COVID-19。2019新型冠状病毒肺炎主要经飞沫、接触传播，人群普遍易感。2019新型冠状病毒感染的一般症状有：发热、乏力、干咳，逐渐出现呼吸困难，部分患者起病症状轻微，甚至可无明显发热。严重症状有：急性呼吸窘迫综合征、脓毒性休克、难以纠正的代谢性酸中毒、出凝血功能障碍。除上述症状，还有可能具有如下不典型症状：如轻度纳差、乏力、恶心呕吐、腹泻、头痛等。从目前的收治的病例情况看，多数患者预后良好，少数患者病情危重，甚至与其它基础性疾病并发导致死亡。因此及时、准确检测该新型冠状病毒十分重要。

流感病毒（influenza virus）属于正粘病毒科（Orthomyxoviridae），为单链RNA膜病毒。流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。流感病毒颗粒外膜有两种类型表面糖蛋白，一型为血细胞凝集素(H)，分为 15个亚型，一型为神经氨酸酶(N)，分为9个亚型。它分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的。其中，甲型流感的传染源主要是病人，其次是隐性感染者，以空气飞沫传播为主，其次是通过病毒污染的茶具、食具、毛巾等间接传播，密切接触也是传播流感的途径之一。病人自发病后5d内均可从鼻涕、口涎、痰液等分泌物排出病毒，传染期约1周，以病初2～3d传染性最强。感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高。而肺炎是最常见的并发症。乙型流感病毒仅在人之间传播，呈暴发或小流行，不引起世界性流感大流行。乙型和甲型流感的临床症状相似，但是甲型流感病毒导致的住院率四倍于乙型流感病毒。乙型流感通常有肌炎及胃肠道症状。乙型流感病毒的抗原变异很慢。

人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的；丙型流感病毒虽然也能感染人类，但其抗原稳定，致病力较弱，主要侵犯幼儿和免疫力低下的人群。甲型流感病毒是最为常见的流感病毒，其亚型被称为禽流感。甲型流感病毒最容易发生抗原变异，这种变异被称为“飘变”(drift)，形象地说，“飘变”就是病毒通过细小的变化伪装自己，从而达到躲避人体免疫系统识别的目的。流感大流行就是甲型流感病毒出现新亚型或旧亚型重现引起的。甲型流感病毒可以进一步分为H1N1、H3N2、H5N1、H7N9等亚型(其中的H和N分别代表流感病毒两种表面糖蛋白)。甲型流感对人类致病性高，曾多次引起世界性大流行。乙型流感病毒的抗原变异较小，通常只引起流感的局部爆发。

由此可见，新型冠状病毒的感染后的症状与普通流感极其相似，早期快速诊断区分患者感染类型就能够及时指导临床治疗，为患者的合理用药提供依据，这对于对疫情监测以及预防具有重要意义。因此，发明一种能够同时快速准确检测区分新型冠状病毒COVID-19与流感病毒的方法和试剂盒显得尤为迫切。