[发明专利]一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒在审
| 申请号： | 202010372372.2 | 申请日： | 2020-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN111549151A | 公开（公告）日： | 2020-08-18 |
| 发明（设计）人： | 张鹏;唐春花;邢宽;何志健;谢珍;倪海钰;周权;何贵伦;安雪茹;李平;江晓琴 | 申请（专利权）人： | 南京实践医学检验有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/14;C12Q1/04;C12R1/44;C12R1/46;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南京瑞华腾知识产权代理事务所(普通合伙) 32368 | 代理人： | 梁金娟 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市江北新区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 多种 细菌 耐药 基因 试剂盒 | ||
1.一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其中包括引物组，
用于检测甲氧西林葡萄球菌基因的引物如下：
F：5’-GCAATTCACATAAACCTCATATGTTC-3’；
R：5’-ACCTCATATGTTCTGATACATTCA-3’；
用于检测青霉素肺炎链球菌基因的引物如下：
F：5’-GACAAATGTAGACCAAGAAGCTCAAG-3’；
R：5’-GTACGAATTCTCCATTTCTGTAGAGG-3’；
用于检测万古霉素肠球菌基因的引物如下：
F：5’-AAGCTCAGCAATTTGTATGG-3’；
R：5’-CGCTATTGACTTTTTCACAC-3’；
Taq酶、dNTP、MgCl2和PCR反应缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述Taq酶浓度为0.03-0.12U/μL。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述PCR反应缓冲液包括Tris-HCl、KCl、(NH4)2SO4、MgSO4、TritonX-100。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述Tris-HCl的PH为8.9。
5.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述Tris-HCl的浓度为15-25mM。
6.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述KCl和所述(NH4)2SO4的浓度均为8-12mM。
7.根据权利要求1所述的一种用于检测多种细菌耐药基因的试剂盒，其特征在于：所述MgSO4的浓度均为2mM。
8.一种根据权利要求1所述的用于检测多种细菌耐药基因的方法，其特征在于：按照先后顺序包括以下步骤：
步骤一：待测样品DNA的提取；
步骤二：数字PCR反应液的配置；
步骤三：制备滴液芯片；
步骤四：运行液滴芯片扩增程序后，采用生物芯片阅读仪进行分析后输出报告。
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