[发明专利]环糊精葡萄糖基转移酶突变体T383A及其制备方法有效
| 申请号： | 202010376738.3 | 申请日： | 2018-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN111607576B | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;杜立 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 环糊精 葡萄 糖基转移酶 突变体 t383a 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种环糊精葡萄糖基转移酶的突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第383位的苏氨酸突变为丙氨酸，命名为T383A。
2.权利要求1所述突变体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)根据确定的突变位点，设计定点突变的突变引物，以携带环糊精葡萄糖基转移酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含编码突变体的基因的质粒载体；
(2)将含编码突变体的基因的质粒载体转化进宿主细胞；
(3)挑选阳性克隆进行发酵培养，离心上清即为环糊精葡萄糖基转移酶突变体的粗酶液。
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述质粒载体为pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一种。
4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述含编码突变体的基因的质粒载体为pET20b(+)-cgt。
5.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述宿主细胞为细菌或真菌细胞。
6.编码权利要求1所述突变体的基因。
7.携带权利要求6所述基因的质粒或细胞。
8.权利要求1所述突变体在食品、医药、化工领域的应用。
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