[发明专利]一种核酸检测微流控芯片及其应用

权利要求书

1.一种核酸检测微流控芯片，其特征在于，包括连通的RT-RPA反应区域和试纸检测区域；

所述RT-RPA反应区域包括依次连通的核酸样本加样区、第一缓冲液池、第二缓冲液池、RT-RPA反应液池、等温扩增池、扩增产物池；

所述试纸检测区域包括试纸缓冲液池和试纸储存池。

2.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述RT-RPA反应区域和试纸检测区域通过微管道连通。

3.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述微管道的宽度为180～220μm，所述微管道的深度为80～120μm。

4.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述第一缓冲液池中添加第一缓冲液；所述第一缓冲液以水为溶剂，包括以下浓度的组分：肌型肌酸肌酶80～120ng/μL、磷酸肌酸45～55mmol/L、ATP 2～4mmol/L、聚乙二醇20M 4～6wt％、二硫苏糖醇1～3mmol/L、三羟甲基氨基甲烷45～55mmol/L、特异性引物1μmol/L和乙酸钾80～120mmol/L。

5.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述第二缓冲液池中添加第二缓冲液；所述第二缓冲液为10～20mmol/L的乙酸镁水溶液。

6.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，RT-RPA反应液池中添加RT-RPA反应体系；所述RT-RPA反应体系包括以下浓度的组分：莫洛尼小鼠白血病病毒重组逆转录酶M-MoLV RT 25～35ng/μL、T4 UvsX重组蛋白110～130ng/μL、T4 UvsY重组蛋白55～65ng/μL、T4 gp32重组蛋白550～650ng/μL、枯草芽孢杆菌DNA重组聚合酶Bsu DNApolymerase 25～35ng/μL、dNTP 700～900μmol/L、poly(A)0.08～0.12mmol/L和Oligo(dT)_12-180.08～0.12mmol/L。

7.根据权利要求6所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述RT-RPA反应体系的添加量为40～60μL。

8.根据权利要求6或7所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述RT-RPA反应体系以干粉的形式添加。

9.根据权利要求1所述的核酸检测微流控芯片，其特征在于，所述试纸储存池放置核酸检测试纸。

10.权利要求1～9任意一项所述的核酸检测微流控芯片在核酸检测中的应用。