[发明专利]一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法、药物载体及其应用

权利要求书

1.一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征是包括以下步骤：

步骤1、合成氧化石墨，以石墨为原料制备氧化石墨烯GO；

步骤2、利用微波辅助还原壳聚糖功能化修饰氧化石墨烯GO得到纳米薄片ChrGO。

2.根据权利要求1所述的一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征在于，所述步骤1进一步包括：

步骤1-1、将石墨、P₂O₅、K₂S₂O₈加入浓硫酸溶液的圆底烧瓶中，预定温度条件下预氧化反应若干时长；

步骤1-2、预氧化的石墨用水清洗去除产物中残留的酸，在室温中干燥；

步骤1-3、取预定质量的预氧化石墨放入浓硫酸的烧瓶中搅拌，在搅拌的过程中逐渐加入KMnO₄；

步骤1-4、将混合物保持预定温度，搅拌反应若干时长后，缓慢加入去离子H₂O，再加入H₂O；

步骤1-5、加入预定浓度的H₂O₂，得到亮黄色溶液，产物用HCl溶液洗涤，去除金属离子，用去离子H₂O反复洗涤，直到pH为中性；

步骤1-6、真空烤箱中干燥得到氧化石墨烯GO。

3.根据权利要求1所述的一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征在于，所述步骤2以不含细胞的酵母提取物为原料，采用微波辅助还原法制备ChrGO，步骤2进一步包括：

步骤2-1、将储存的酵母细胞接种到培养基中，振荡培养若干时长，活化酵母细胞；

步骤2-2、活化的酵母细胞被转移到蔗糖溶液中，振荡培养若干时长；离心分离得到无细胞酵母提取液；

步骤2-3、将壳聚糖溶解于乙酸溶液中，与酵母抽提液混合，用氢氧化钠溶液调节混合溶液的pH值至中性；

步骤2-4、在强磁搅拌下加入GO溶液；

步骤2-5、将制备好的溶液转移到微波合成设备进行微波反应：升温至预定温度后保温，所得的ChrGO经过过滤器纯化后冷冻干燥保存。

4.根据权利要求1所述的一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征在于，在制备得到ChrGO之后检测GO和ChrGO的生物相容性。

5.根据权利要求4所述的一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征在于，检测GO和ChrGO的生物相容性进一步包括如下步骤：

步骤3-1、BT-474和Cos-7细胞分别在胎牛血清中培养，并放置在加湿空气培养箱中培养；

步骤3-2、对BT-474或Cos-7细胞的细胞毒性进行测试：细胞以预定密度接种于96孔的平板上，在GO和ChrGO处理前预孵育预定时长；

步骤3-3、将稀释后的样品溶液加入细胞中，再孵育预定时长；

步骤3-4、测定细胞活力并测量吸光度。

6.根据权利要求5所述的一种微波辅助合成壳聚糖修饰的氧化石墨烯的制备方法，其特征在于，在检测完GO和ChrGO的生物相容性之后进行药物的负载、释放测试。