[发明专利]一种核酸-抗体双重检测新型冠状病毒的试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种核酸‑抗体双重检测新型冠状病毒的试剂盒及其制备方法，属于病毒检测技术领域，所述试剂盒包括核酸检测体系和抗体检测试纸条；所述核酸检测试纸条的结合区吸附金包硅球纳米粒子修饰的检测探针；所述核酸检测试纸条的检测区包括检测线和质控线；所述检测线上喷涂捕获探针，所述质控线上喷涂质控探针。所述抗体检测试纸条的检测区包括第一检测线、第二检测线和质控线；所述第一检测线喷涂新型冠状病毒特异性N蛋白与S蛋白的混合物；所述第二检测线喷涂新型冠状病毒特异性N蛋白与S蛋白的混合物；所述质控线喷涂二抗。所述试剂盒操作简单，扩增结果可直接肉眼判读，降低漏检率。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，尤其涉及一种核酸-抗体双重检测新型冠状病毒的试剂盒及其制备方法。

背景技术

目前针对新型冠状病毒感染的检测试剂分为两类：一类是对病毒的直接检测，另一类是间接检测。直接检测就是目前实验室广泛应用的针对病毒的核酸检测，检测新型冠状病毒基因中某些特定核酸序列的存在，是目前公认的新型冠状病毒感染实验室诊断的金标准方法。间接检测试剂分为针对病毒抗体检测和针对病毒抗原的检测。抗体检测试剂是检测血清中由病毒进入人体后刺激人体产生的IgM或IgG抗体，IgM抗体出现较早，IgG抗体出现较晚。病毒抗原检测主要是检测病毒表面的一些蛋白质。

目前市面上新型冠状病毒核酸检测试剂盒大多是采用实时荧光定量PCR方法，该方法检测病毒很成熟，但也有许多局限性，比如：对样本采集，实验室要求，实验人员的技术水平要求高，而且检测时间长。从前方反馈来看，现在针对新型冠状病毒核酸检测试剂盒漏检率高，通常需要采集三到四次样才能确诊。单一的针对IgM或IgG抗体检测，特异性较低且感染初期难以检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种核酸-抗体双重检测新型冠状病毒的试剂盒及其制备方法；所述试剂盒结合核酸检测和抗体检测，大大的降低了漏检率，操作简单，能够实现新型冠状病毒的快速、准确的检测。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种核酸-抗体双重检测新型冠状病毒的试剂盒，包括核酸检测体系和抗体检测试纸条；

所述核酸检测体系包括重组酶聚合酶扩增检测体系和核酸检测试纸条；所述重组酶聚合酶扩增检测体系包括扩增新型冠状病毒特异性基因的引物组；所述引物组中的上游引物包括第一延伸序列，所述引物组的下游引物包括第二延伸序列；

所述核酸检测试纸条的结合区吸附金包硅球纳米粒子Si0₂@Au修饰的检测探针；所述检测探针与所述第一延伸序列互补配对；

所述核酸检测试纸条的检测区包括检测线和质控线；所述检测线上喷涂捕获探针，所述质控线上喷涂质控探针；所述捕获探针与第二延伸序列互补配对；所述质控探针与检测探针互补配对；

所述抗体检测试纸条的检测区包括第一检测线、第二检测线和质控线；所述第一检测线喷涂新型冠状病毒特异性N蛋白与S蛋白的混合物；所述第二检测线喷涂新型冠状病毒特异性N蛋白与S蛋白的混合物；所述质控线喷涂二抗。

优选的，所述新型冠状病毒特异性基因包括编码ORF1ab的基因和编码核壳蛋白N的基因。

优选的，所述引物组包括上游引物Orf1ab F和下游引物Orf1ab R；所述上游引物Orf1ab F和下游引物Orf1ab R的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；

所述引物组还包括上游引物核壳蛋白F和下游引物核壳蛋白R；所述上游引物核壳蛋白F和下游引物核壳蛋白R的核苷酸序列如SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示；

所述检测探针包括第一检测探针和第二检测探针；所述第一检测探针和第二检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.8所示；