[发明专利]一种具有免疫调节活性的浒苔多糖及其制备方法有效
申请号: | 202010378781.3 | 申请日: | 2020-05-07 |
公开(公告)号: | CN111607010B | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 廖志新;赵士峰;侯培蕾;冯艳;孙波;李妍;刘玲菲 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A23L33/125 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 景鹏飞 |
地址: | 210096 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 免疫调节 活性 多糖 及其 制备 方法 | ||
1.一种具有免疫调节活性的浒苔多糖,其特征在于:通过碱液提取利用阴离子柱层析和凝胶柱层析分离纯化得到,所述的浒苔多糖分子量分布范围为1000-5000Da,平均相对分子量为4259Da,为β构型吡喃糖,主要由摩尔比分别为87.42%、7.10%、1.67%、2.67%和1.13%的甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和木糖组成;
所述的浒苔多糖的提取分离方法包括如下步骤:
步骤1:将粉碎的浒苔脱脂处理,脱出小分子杂质,晾干后将浒苔用去离子水提取,得到水提残渣;
步骤2:步骤1得到的水提的残渣再利用0.3M NaOH溶液提取,脱蛋白,透析,冷冻干燥以后得到粗提多糖;
步骤3:将步骤2得到的粗提多糖溶于去离子水,上样至DEAE Cellulose-52阴离子交换层析柱中,并用去离子水溶液进行洗脱,采用苯酚-硫酸法检测各试管洗脱液中糖含量并绘制洗脱曲线;将收集的洗脱峰组分经透析、冷冻干燥处理后,重新溶解于去离子水中,随后上样至Saphedex G-100凝胶柱中,以去离子水为洗脱液洗脱,同样采用苯酚-硫酸法检测多糖含量并收集洗脱峰组分,透析、浓缩、冷冻干燥处理后获得纯化浒苔多糖;
在所述的步骤3中,所述的浒苔多糖采用如下方法进行组成分析:将纯化获得的浒苔多糖用超纯水配制成样品溶液,滤膜过滤,取过滤样品液上样至高效凝胶渗透色谱HPGPC,确认浒苔多糖纯度及相对分子质量;然后另取纯化后的浒苔多糖,经三氟乙酸水解、PMP柱前衍生化进行HPLC分析,测定浒苔多糖的单糖组成;另取纯化后的浒苔多糖,经研细、压片机压片后在4000cm-1-400cm-1范围内进行红外光谱扫描分析,获得浒苔多糖的糖苷键类型。
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