[发明专利]14-羟基双氢青蒿素与衍生物及其制备方法和应用

说明书

本发明属于医药技术领域，具体涉及14‑羟基双氢青蒿素与衍生物及其制备方法和应用。14‑羟基双氢青蒿素及其衍生物通过Streptomyces griseus ATCC 13273生物催化获得。本发明所涉及的化合物14‑羟基双氢青蒿素是发明人利用生物转化方法首次在双氢青蒿素C14位引入活性羟基获得，这一羟基的引入为双氢青蒿素结构修饰提供了一个全新的活性位点。我们研究发现相对于双氢青蒿素（C14羟基未取代），14‑羟基双氢青蒿素水溶性提高。药效学研究表明14‑羟基双氢青蒿素及其衍生物具有良好的抗炎功效。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种新化合物14-羟基双氢青蒿素及其衍生物在制备抗炎药中的应用。

背景技术

炎症(inflammation)：是指机体对于物理、化学或生物等外来伤害刺激所产生的一种防御反应，主要表现为红、热、肿、痛甚至功能障碍等临床症状。炎症也是导致许多疾病发生发展的诱因，它与肿瘤、感染性疾、肺部疾病、风湿性关节炎(RA)、慢性支气管炎、炎症性肠病、动脉粥样硬化病、神经退行性疾病、等均存在联系。尽管目前市场上抗炎药物较多,但高效低毒的药物较少,临床迫切需要此类新药。从天然产物中寻找潜在的先导化合物并对其结构进行修饰获得衍生物，从而得到潜在的药物是药物开发的中药手段之一。

青蒿素是一种倍半萜内酯类化合物，是一种治疗疟疾的特效天然产物。近年来药学研究者围绕青蒿素进行了大量的结构改造及适应症研究。大部分研究均表明青蒿素类化合物发挥生物活性均与其结构中的过氧桥结构有关，由于过氧桥结构的不稳定性，目前对青蒿素的结构修饰非常有限，大部分集中在C11位、C12位。本课题组多年致力于青蒿素结构的修饰改造，前期成功在C9位引入羟基并在此基础上获得了一系列高活性的衍生物，已申请专利(专利号：201610294122.5)。

青蒿素类化合物中C-14位孤立惰性甲基C-H键的选择性羟化在有机化学反应中极为困难，因此在现有技术中未有在C-14做修饰的文献报道；Ponnapalli MG，Biotransformation of Artemisinin to14-Hydroxydeoxyartemisinin:C-14Hydroxylation by Aspergillus flavus.J Agric Food Chem.2018Oct 10；66(40):10490-10495.doi:10.1021/acs.jafc.8b03573.报道：其在青蒿素14位通过生物催化的方式增加了羟取代基，但如下反应可知其牺牲了青蒿素的过氧桥结构，由于青蒿素的过氧桥是其药理活性基团，该文献报道事实上是破坏了青蒿素主要结构，同时丧失或减弱了青蒿素的活性。

因此寻找青蒿素类化合物的14位羟基取代反应方法，同时保持过氧桥结构不受破坏成了本领域技术难题。

发明内容

本发明目的在于提供一种C14位羟基化修饰的双氢青蒿素及其衍生物，寻找新的具有生物活性成分，提供上述化合物在抗炎药物中的应用。本发明涉及式I所示的14-羟基双氢青蒿素，及式Ⅱ所示衍生物。

具体的，本发明涉及以下技术方案：

本发明的第一个方面，14-羟基双氢青蒿素可通过下面方法制备：

(1)微生物发酵制备：

将斜面保藏的Streptomyces griseus ATCC 13273菌种接种于种子液培养基中，在28℃、转速180r/min下培养48h，获得一级种子液；

将一级种子液以2～4％(v/v)的接种量接种于发酵培养基中，在28℃、转速180r/min，培养24h，再加入双氢青蒿素(丙酮助溶)，浓度为0.5-2.0g/L，继续在28℃、转速180r/min下培养48h，得到发酵液。

(2)提取分离：