[发明专利]一种KLP1有效

专利信息
申请号: 202010392309.5 申请日: 2020-05-11
公开(公告)号: CN111549038B 公开(公告)日: 2021-04-13
发明(设计)人: 宋丽敏;梁文星;徐阳;郭倩倩 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/12;A01H6/82
代理公司: 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 代理人: 王晓晓
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 base italic klp1
【权利要求书】:

1.一种KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述KLP1基因的全长基因编码序列如SEQ ID NO.9所示;所述植物为番茄。

2.根据权利要求1所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:

(1)构建KLP1基因敲除重组载体:根据KLP1基因的全长基因编码序列设计引物并进行PCR扩增;扩增产物纯化后,使用限制性内切酶对其进行酶切,回收酶切产物后与质粒进行连接,得到KLP1基因敲除重组载体;

(2)构建KLP1基因敲除重组菌株:将所述KLP1基因敲除重组载体转化至农杆菌中,得到KLP1基因敲除重组菌株;

(3)构建KLP1基因敲除株系:将所述KLP1基因敲除重组菌株转化进植物子叶中,使用抗生素进行筛选并培养至得到再生植物,即得到KLP1基因敲除株系。

3.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述步骤(1)中引物的序列为

KLP1-F0:

5’-ATATATGGTCTCGTTTGAAGGTGAAGATCTAAGAGCGTTTTAGAGC

TAGAAATAGC-3’;

KLP1-R0:

5’-ATTATTGGTCTCGAAACGAACCCGTCACTCTTCTGAACAAACTACA

CTGTTAGATTC-3’。

4.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述质粒为pTX-041。

5.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述农杆菌为LBA4404。

6.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述步骤(3)中培养的条件为16h光照/8h黑暗。

7.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,所述KLP1基因敲除株系与野生型株系相比,叶子上的病斑直径明显减小。

8.根据权利要求2所述的KLP1基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用,其特征在于,番茄KLP1基因敲除株系与野生型株系相比,叶片上的灰霉量明显降低。

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