[发明专利]李斯特菌在筛选细胞呼吸链抑制药物上的应用

权利要求书

1.一种细胞呼吸链抑制药物筛选方法，其特征在于：所述细胞呼吸链抑制药物筛选方法通过监测药物对李斯特菌在导电基质中氧化还原电流的大小变化，判断药物对李斯特菌呼吸链抑制效果，从而筛选具有细胞呼吸链抑制作用的药物；所述导电基质采用DM溶液；并在进行药物对李斯特菌于DM溶液中氧化还原电流的大小变化监测前，先将李斯特菌置于DM溶液中浸泡消除细菌原本存储的还原能力，再向DM溶液中通N₂除去溶解氧；在进行监测时，在DM溶液中，在-0.7V至+0.3 V之间进行循环伏安扫描，扫描速度为0.1 V·s^-1，直到获得稳定的平滑的循环伏安曲线，再加入所需检测的药物，利用电化学三电极体系监测工作电极表面氧化还原反应，通过氧化还原电流的变化进行细胞呼吸链抑制效果的筛选：当氧化还原反应增加，则表明该药物对细胞呼吸链具有一定的抑制作用。

2.根据权利要求1所述的细胞呼吸链抑制药物筛选方法，其特征在于：所述氧化还原电流大小变化的监测是通过采用电化学分析方法监测含李斯特菌的DM溶液的电子信号。

3.根据权利要求2所述的细胞呼吸链抑制药物筛选方法，其特征在于：所述电化学分析方法采用循环伏安法、电化学交流阻抗法。

4.一种采用权利要求1至3任一所述细胞呼吸链抑制药物筛选方法的细胞呼吸链抑制药物筛选平台，其特征在于：所述细胞呼吸链抑制药物筛选平台包括电解杯、三电极体系和电化学工作站；所述电解杯通过三电极体系与电化学工作站相连；所述电解杯内置有含李斯特菌的导电基质溶液。

5.根据权利要求4所述的细胞呼吸链抑制药物筛选平台，其特征在于：所述导电基质溶液采用DM溶液；所述三电极体系中工作电极采用玻碳电极/ITO电极，参比电极采用饱和甘汞电极，对电极采用铂丝电极。

6.根据权利要求5所述的细胞呼吸链抑制药物筛选平台，其特征在于：所述DM溶液中每升含有：NaHCO₃ 2.5g，CaCl₂·2H₂O 0.09g，NH₄Cl 1.0g， MgCl₂·6H₂O 0.2g，NaCl 10g，HEPES 7.2g，K₂HPO₄ 36mg，Na₂SO₄ 0.71mg，以及10 ml微量矿物溶液；

每升所述微量矿物溶液包含：FeCl₂·4H₂O 0.2g，Na₂WO₄·2H₂O 0.02g，MnCl₂·4H₂O0.1g， CoCl₂·6H₂O 0.1g，ZnCl₂ 0.05g，CuCl₂·2H₂O 0.002g，H₃BO₃ 0.005g，Na₂MoO₄·2H₂O0.01g，Na₂SeO₃ 0.017g，NiCl₂·6H₂O 0.024g，以及C₆H₉NO₆ 1.5g。