[发明专利]普通油茶通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株的方法

权利要求书

1.一种普通油茶通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)取7月中旬普通油茶幼胚，于4℃保存；

(2)将所述步骤(1)取得的普通油茶幼胚消毒并切块进行接种，每个幼胚切成3-5块后接种至愈伤组织诱导培养基，此过程于所述普通油茶幼胚取回后3天内完成；

(3)将所述步骤(2)接种幼胚后的愈伤组织诱导培养基进行愈伤组织诱导培养，培养时间1个月；

(4)将所述步骤(3)中生长良好的愈伤组织继代至分化培养基进行胚状体分化，此过程中继代两次，培养时间2个月；

(5)将所述步骤(4)中出现胚状体的外植体转入胚状体发育及植株再生培养基，进行胚状体发育和植株再生，此过程中继代1次，培养时间2个月；

(6)将所述步骤(5)中具有明显子叶的胚状体转至生根培养基，进行生根培养，此过程培养时间为1个月；

(7)将所述步骤(6)中获得的完整植株驯化移栽至营养钵内继续生长；

其中，所述步骤(2)～(3)中，愈伤组织诱导培养基为含终浓度2.0mg/L2,4-D和1.0mg/LKT的MSB培养基，或为含终浓度5.0mg/L NAA和1.0mg/L KT的MSB培养基；所述步骤(4)中，分化培养基为含终浓度1.0mg/L NAA和1.0mg/LKT的MSB培养基；所述步骤(5)中，胚状体发育及植株再生培养基为含终浓度1.0mg/L NAA和3.0mg/L 6-BA的MSB培养基；所述步骤(6)中，生根培养基为含终浓度3.0mg/L 6-BA的1/2MSB培养基；所述步骤(3)～(7)的培养条件均为28℃、光照16小时/天、光照强度2000lux以上的恒温培养箱培养；所述MSB培养基具体组成如下：硝酸钾1.9g/L、硫酸铵1.65g/L、磷酸二氢钾0.17g/L、七水硫酸镁0.37g/L、二水氯化钙0.44g/L、四水硫酸锰22.3mg/L、硼酸6.2mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、碘化钾0.83mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、乙二胺四乙酸钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸1mg/L、盐酸硫胺素10mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、肌醇100mg/L，蔗糖30g/L、琼脂9g/L，pH为5.8～6.0。