[发明专利]一种植物源神经酰胺提取物的精制纯化方法

说明书

本发明涉及一种对植物源神经酰胺提取物粗品进行精制纯化的方法，采用盐析‑初次高分子磁性微球分离‑二次高分子磁性微球分离‑结晶的精制纯化流程，克服了现有纯化方法只能得到低纯度神经酰胺的缺陷，可以提供99%或更高纯度的高纯神经酰胺，使其可直接用于化妆品、药物领域。本发明纯化方法采用二次结晶和特定的磁性高分子微球吸附相结合的手段，能显著提高产品纯度，并有效降低产品损失，适合工业化生产。

技术领域

本发明属于植物提取物纯化分离技术领域，具体涉及一种植物源神经酰胺粗品的联合精制纯化方法。

背景技术

神经酰胺是一类由神经鞘氨醇和长链脂肪酸通过酰胺键缩合而成的鞘氨醇类物质，分子式中通常具有酰胺基、多羟基以及不同长度的长链烷基链等基团，因此具有亲水亲油的双亲特性。神经酰胺具有屏障、保湿、美白、抗衰老、抗肿瘤等功效，被广泛地应用于医药、食品和化妆品领域。神经酰胺可分天然和化学合成两类，天然神经酰胺通常来源于植物性提取、动物源提取以及发酵菌发酵提取。化妆品方面应用以天然神经酰胺产品为主。

其中，在上述各种来源中，小麦、米、大豆等植物来源的神经酰胺的安全性较高，可很好地满足制药业和化妆品市场的需求。但是由于植物来源的神经酰胺含量很低和既亲水又亲油的性质，提取分离非常困难，目前通常通过有机溶剂提取、柱层析分离等手段，难以得到高纯度的神经酰胺。目前来看，一般情况下采用上述普通的有机溶剂提取和柱层析分离方法仅能得到50-70%纯度的产品。

在植物来源中，魔芋中含有丰富的神经酰胺。从魔芋中分离提取神经酰胺的方法被普遍开发。例如申请号201410040856.1的专利公开了一种魔芋飞粉中神经酰胺的提取分离方法，该方法先利用95％乙醇超声震荡提取魔芋神经酰胺，提取液经浓缩后经超临界CO2萃取，萃取物再经过超临界CO2二次萃取，最终得到含量为73.8％的产品；申请号201210133207.7的专利申请采用70％乙醇溶液超声波提取魔芋神经酰胺，提取液浓缩后用石油醚萃取3次，之后经硅胶柱层析纯化，以石油醚：乙酸乙酯溶剂进行洗脱，洗脱液浓缩后再次经硅胶柱层析纯化，以乙醇：水为溶剂进行洗脱，洗脱液浓缩后经离心机离心、真空冷冻干燥制的样品，工艺繁琐生产成本高等问题。其他的相关专利还可列举如下。

CN102190689提供了一种从魔芋中提取出的神经酰胺粗产品的纯化方法。采用硅胶柱层析分两次纯化：采用干法上样，有机溶剂梯度洗脱，分第一次硅胶柱层析和第二次硅胶柱层析两次柱层析，纯化神经酰胺。

CN102070681公开了一种魔芋神经酰胺及其提取方法，包括以下步骤：(1)以魔芋副产物或/和废弃物为原料，用45％-85％(V/V)的乙醇浸泡1-2小时，收集浸出液，转入蒸馏回收装置，静置分层收集油相；将水相减压和/或冷冻干燥浓缩后用乙酸乙酯萃取纯化，收集油相；合并所有油相，浓缩至膏状；(2)用45％-80％(V/V)乙醇将浓缩物溶解，用乙酸乙酯萃取，再用石油醚对乙醇相萃取，合并乙酸乙酯和石油醚的残留液体，干燥浓缩除去溶剂，即可得到含0.5-20％魔芋神经酰胺的粗级产品。

CN102351730公开了一种从魔芋飞粉中制备神经酰胺的方法，其特征在于包括如下操作步骤：a)神经酰胺的粗提：以魔芋飞粉为原料，用乙醇溶液提取，然后用石油醚萃取；b)硅胶柱层析纯化：将硅胶湿法装柱，湿法上样，用石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱；c)中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化：湿法装柱，湿法上样；用乙醇-水为洗脱剂进行梯度洗脱，干燥得纯度95％神经酰胺。

CN102675139公开了从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法，由选料、综合提取、浓缩、萃取、梯度洗脱、干燥、再次梯度洗脱和干燥八大工序完成；从魔芋飞粉中提取神经酰胺的提取率达75%，纯度达95%。