[发明专利]一种基于水溶性苝酰亚胺衍生物的快速可视化检测方法

说明书

本发明涉及叶酸检测领域，公开了一种基于水溶性苝酰亚胺衍生物的快速可视化检测方法。具体的，公开了一种检测叶酸的方法，以式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物作为探针。所述苝酰亚胺衍生物具有良好的水溶性，并且能够实现高灵敏度、特异性且可视化地检测叶酸。本发明提供的检测方法具有较高的检测效率和灵敏度。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种基于水溶性苝酰亚胺衍生物的快速可视化检测方法。

背景技术

叶酸，又称酰谷氨酸，是一种水溶性B族维生素，广泛存在于一些新鲜水果、绿叶蔬菜、动物肝脏和豆类中。其作为一碳单位的辅因子，在维持人体生长和代谢的许多生化过程中起着重要作用。许多研究证实，叶酸缺乏会导致生理功能障碍和某些疾病，如巨幼细胞贫血、精神退行性疾病、新生儿神经管畸形、骨质疏松等症状。

目前，叶酸缺乏被认为是一个世界性的健康问题，世界卫生组织(WHO)已明确规定了每日叶酸的推荐摄入量。随着对健康的重视，叶酸被添加到各种特殊的饮食和保健食品中。因此，对食品中叶酸的快速准确检测，对于指导叶酸的摄入，保证安全性和有效性具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种基于水溶性苝酰亚胺衍生物的快速可视化检测方法，具体公开了一种检测叶酸的方法，克服现有检测叶酸的方法中存在的检测效率低，且灵敏度低的缺陷。

为了实现上述目的，本发明提供了以下的技术方案：

第一，本发明提供了式(I)所示的苝酰亚胺衍生物在检测叶酸中的应用：

上述式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物具有良好的水溶性，并且能够实现高灵敏度且特异性地检测叶酸，在检测中呈现出明显的特异性和抗干扰能力。

本发明的式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物在溶液中构象和聚集状态对外界刺激展现出不同的状态，进而引起其光学特性的变化，如溶液颜色的变化和荧光的开启或淬灭现象。

因此上述苝酰亚胺衍生物用于叶酸的检测时，能够实现荧光响应的效果，即苝酰亚胺衍生物的荧光发生淬灭，并且在紫外灯照射下该淬灭效果肉眼可见。

并且，上述苝酰亚胺衍生物的检测限低至29.2nmol/L，且在溶液中的可视化效果明显，肉眼检测限低至6μmol/L。

本发明提供的苝酰亚胺衍生物之所以具有优异的叶酸检测性能，可能是基于如下原理：本发明的苝酰亚胺衍生物与叶酸可通过多重非共价作用进行识别，在水溶液中二者形成稳定的超分子聚集体，导致探针荧光信号的改变。

本发明对于上述式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物的来源并无特殊限定，可以为一般市售或按照本领域技术人员熟知的方法制备。

为了获得更高质量和收率的式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物，本发明提供如下所述的优选的制备方法制备式(I)所示结构的苝酰亚胺衍生物，具体地：

第二，本发明提供了上述苝酰亚胺衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将式(II)所示的化合物与式(III)所示的化合物进行第一接触反应，得到式(IV)所示的化合物；

(2)在溶剂存在下，将所述式(IV)所示的化合物与甲醛、甲酸进行第二接触反应，得到式(V)所示的化合物；

(3)在溶剂存在下，将所述式(V)所示的化合物与甲醇、碳酸钠、碘甲烷进行第三接触反应，得到式(I)所示的化合物；

本发明对式(II)所示的化合物的来源没有特别的限制，例如可以通过商购获得，也可以通过采用现有技术提供的方法合成得到。