[发明专利]黄花蒿细胞生物转化二氢去氧青蒿素B的方法和用途

权利要求书

1.权利要求1所述黄花蒿细胞生物转化二氢去氧青蒿素B的方法和用途。通过细胞培养，考察并优化二氢去氧青蒿素B的最佳转化条件，产物的积累、分离纯化及结构鉴定，以及细胞中青蒿素含量的检测，qRT-PCR法检测最佳生物转化条件下黄花蒿细胞中基因的表达水平。包括以下方法和步骤：

(1)黄花蒿脱分化细胞的诱导、固体培养及液体悬浮培养；

(2)光照培养和暗培养条件下二氢去氧青蒿素B生物转化条件的优化；

(3)转化产物的积累、分离纯化以及利用HR-ESI-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR进行结构鉴定；

(4)黄花蒿细胞冻干、乙酸乙酯超声提取以及GC-MS检测青蒿素含量。

(5)qRT-PCR法检测黄花蒿细胞中HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR、DBR2和ALDH1的表达水平。

2.权利要求2所述通过黄花蒿悬浮细胞生物转化法得到三个化合物：3α-hydroxydihydro-epi-deoxyarteannuin B(1)，9β-hydroxy dihydro-epi-deoxyarteannuin B(2)，14-hydroxy dihydro-epi-deoxyarteannuin B(3)。