[发明专利]一种肝细胞外间隙信息采集方法在审
申请号: | 202010407052.6 | 申请日: | 2020-05-14 |
公开(公告)号: | CN111487248A | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 李玉亮;王维;陈超;于哲;王武杰 | 申请(专利权)人: | 山东大学第二医院 |
主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36;G01N1/34;A61B5/00 |
代理公司: | 北京棘龙知识产权代理有限公司 11740 | 代理人: | 谢静 |
地址: | 250031 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝细胞 外间 信息 采集 方法 | ||
1.一种肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
包括以下步骤:
(1)前处理:将样品进行清洗处理,随后针对所述样品进行标记,静置待用;
(2)初检:将步骤(1)前处理得到的样品,进行石蜡包埋和HE染色,其中石蜡包埋后切片的厚度为1μm-2μm,其中HE染色的具体操作如下,
选择含乙醇的改进的苏木精染液进行染色处理4min,
选择纯水冲洗2min,
选择质量浓度为1%的盐酸浸泡5min,
选择纯水再次冲洗2min,
选择改进的碱性溶液浸没5min,
选择纯水第三次冲洗6min,
选择改进的伊红染液进行染色处理1min,
选择纯水第四次冲洗5min,
37℃烘干15min,中性树胶封固;
其中改进的碱性溶液的组分如下,以重量份计,
其中改进的伊红染液的组分如下,以重量份计,
(3)终检:将步骤(2)初检处理得到的样品进行图像扫描,并对肝细胞外间隙进行评估。
2.根据权利要求1所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(1)中所述样品为离体肝细胞组织,所述离体肝细胞组织的取用方法如下:
经皮进行肝脏部位的穿刺操作;
步骤(1)中所述清洗处理为采用生理盐水进行清洗处理;
步骤(1)中所述的标记方法为采用信息卡与样品绑定的方式;
步骤(1)中所述静置待用具体为将样品遮光密封处理并转移到4℃冷藏室中。
3.根据权利要求2所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(1)中所述穿刺操作具体为取平卧位或斜坡卧位的病人,借助B超,对病人的肝脏在皮肤表面进行轮廓描线,并确定相距最远的两个点,随后沿着两个点之间形成的连接线取中心点,并以中心点为圆心,2cm-3cm距离为半径进行画圆,其中圆形的弧线上任取三点相连形成三角形,随后采用酒精棉球进行消毒,消毒后使用活检针进行肝脏细胞组织的刺取,即可。
4.根据权利要求2所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(1)中所述信息卡具体为具有信息记载的物联卡,所述物联卡上装载有微型电源、控制模块、发射模块、通信模块及存储模块,所述微型电源与所述控制模块相连,所述控制模块分别与所述发射模块、所述通信模块及所述存储模块相连。
5.根据权利要求1所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(2)中石蜡包埋的具体方法如下:
(A)前期脱水:采用酒精和乙醚的混合液进行梯度脱水;
(B)透明处理:将步骤(A)中前期脱水后的样品浸没到透明剂中进行处理;
(C)浸蜡处理:将步骤(B)中透明处理后的样品转移到石蜡模具中进行浸蜡处理。
6.根据权利要求5所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(2)中前期脱水过程中所述酒精与所述乙醚的混合质量比为1:(1.5-2.5);
步骤(2)中前期脱水过程中控制混合液的温度为25℃;
步骤(2)中前期脱水过程中进行遮光处理;
步骤(2)中前期脱水过程中控制混合液的浓度梯度为60%、70%、80%、90%及100%;
步骤(2)中前期脱水过程中控制梯度脱水的时间如下:
步骤(2)中透明处理过程中透明剂的组分如下,以重量份计:
步骤(2)中透明处理过程中浸没时间为15min-32min,浸没的温度为37℃;
步骤(2)中浸蜡处理过程中石蜡浸没液体的制作方法如下:选用二甲苯与石蜡按照质量比为1:3进行混合处理,加热到100℃进行融解,随后冷却到90℃待用。
7.根据权利要求1所述的肝细胞外间隙信息采集方法,其特征在于:
步骤(2)中HE染色处理过程中改进的苏木精染色组分如下,以重量份计:
步骤(2)中HE染色处理过程中温度控制在25℃-35℃。
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