[发明专利]一种肝细胞外间隙信息采集方法

说明书

本发明公开了一种肝细胞外间隙信息采集方法，属于数据信息处理技术领域。它包括以下步骤：(1)前处理：将样品进行清洗处理，随后针对所述样品进行标记，静置待用；(2)初检：将步骤(1)前处理得到的样品，进行石蜡包埋和HE染色；(3)终检：将步骤(2)初检处理得到的样品进行图像扫描，并对肝细胞外间隙进行评估。在本申请中，所采用的采集方法，避免了侵袭性有创检查，可反复进行纤维化评价和对治疗反应的观察，能够实现对病变肝细胞的动态评估，这对了解肝纤维化与纤维溶解的动态过程具有积极效果。

技术领域

本发明属于数据信息处理技术领域，具体地说，涉及一种肝细胞外间隙信息采集方法。

背景技术

肝纤维增生性疾病这一概念是著名肝病学家Hans Popper在1984年提出的，现已知肝纤维化是一组临床病理综合征，多种机体内外致病因素作用下，均可导致异常和过量的细胞外基质增生并沉积，其病理改变是以胶原为主的过度沉积，引起血管受压微循环灌注减少，进一步发展可引起门静脉高压和肝细胞脂肪变性坏死，最后成为不可逆转的硬化。因此，肝纤维化是各类肝实质损害转向肝硬化共同而基本的环节。随着对肝纤维化机制研究的深入，目前有学者研究证实部分肝纤维化或早期肝硬化是可逆的，因此对肝纤维化进行早期诊断、分期有着非常重要的意义。肝穿刺活检被认为是诊断肝纤维化的“金标准”，通过对肝脏活检标本连续性切片、染色可以判断出肝脏小叶结构、炎症范围、纤维化程度等改变。但该检查是一项侵袭性有创检查，只能对肝纤维化进行大致的静态评估，难以反复进行以评价纤维化进展和对治疗的反应，另外该技术不可避免存在穿刺标本的抽样误差、观察者之间的差异，使得越来越多的学者开始质疑其准确性及临床实用价值。寻求可反复使用的无创性方法来评价肝纤维化程度一直是近年来研究的热点、难点。超声、CT、MRI等影像学技术一直是无创性评价肝纤维化的重要手段，近年来开展的CT、MRI功能成像、弹性成像等逐渐成为研究的热点。常规的超声、CT和MRI可以显示肝脏的形态改变，但是对早期肝纤维化诊断不敏感，也不能对纤维化程度进行准确分级。超声造影比单纯的多普勒超声能更好的观察肝纤维化导致的血管结构扭曲和相关血流动力学改变，对纤维化程度进行分级，不过在超声血流动力学指标的选择及定量数值上尚无共识。灌注成像可在肝脏微循环水平上反映器官、组织的血供和血流动力学状态。目前较多的研究认为，肝纤维化门静脉灌注的减少和肝动脉灌注的增加可以鉴别轻度纤维化和中度纤维化。然而灌注成像研究的只是肝脏的某个层面，不能对全肝作全面研究，且灌注成像量化的数学模型也没有统一标准，不同的灌注模型所得的结果存在较大差异，另外灌注成像在扫描上受患者影响因素(呼吸运动、肝淤血、炎症等)较多，并且CT灌注具有一定的辐射性，而MRI灌注扫描成像较慢。

一般认为，肝脏从组织学上有3种间隙存在，即血管腔内间隙(intravascularspace，IVS)、细胞内间隙(intracellular space，ICS)、细胞外血管外间隙(extravascularextracellular space，EES)。肝纤维化的实质是胶原和基质蛋白沉积导致EES的膨胀，正常人EES约占总肝脏液性空间的15％，但是在肝纤维化患者中EES所占比例可以超过50％。Varenika等学者采用CCl4建立大鼠肝纤维化模型并进行对比剂增强CT扫描，通过肝实质强化程度相对血池强化程度的比值推算出肝细胞外间隙大小(extracellularspace，ECS，由EES及IVS共同组成)，其研究结果显示ECS大小与肝纤维化Ishak分级具有明显的正相关性(R 2＝0.751，P0.01)，因此采用这种方法可以对肝纤维化大鼠模型中肝纤维化的程度进行定量评估。随后，Zissen等人也通过一组临床病例证实传统的水溶性碘对比剂经静脉注入一段时间后能够在EES和I VS之间达到平衡分布而不被肝细胞摄取进入IVS，即肝脏CT增强扫描的“平衡期”，此期肝实质强化的程度能间接反映对比剂在肝细胞外间隙(包括IVS及EES)的分布；从而对早期肝纤维做出评估。研究显示正常人的fECS约占总共液性空间的15％，而在肝硬化患者中可以超过50％。

本申请主要尝试采用螺旋CT增强扫描技术，通过肝实质强化程度相对血池强化程度的比值推算出肝细胞外间隙大小(包括血管外肝细胞外间隙及血管内间隙)，从而对肝纤维化进行早期诊断及定量评估。