[发明专利]一种制备CD106高表达间充质干细胞的方法、间充质干细胞及其应用和定向培养基有效
申请号: | 202010409889.4 | 申请日: | 2020-05-15 |
公开(公告)号: | CN111534484B | 公开(公告)日: | 2022-10-11 |
发明(设计)人: | 韩忠朝;张磊升;魏艺萌 | 申请(专利权)人: | 北京汉氏干细胞科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京国帆知识产权代理事务所(普通合伙) 11334 | 代理人: | 刘小哲 |
地址: | 100176 北京市大兴区经济*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 cd106 表达 间充质 干细胞 方法 及其 应用 定向 培养基 | ||
1.一种制备CD106高表达间充质干细胞的方法,其特征在于:包括,
第一步骤(S1),获取足量脐带间充质干细胞(UC-MSCs),作为第一间充质干细胞;
第二步骤(S2),将所述第一间充质干细胞在定向培养基中培养48小时以上,得到第二间充质干细胞,所述定向培养基是指在基础培养基的基础上增加一定量的细胞因子,所添加的细胞因子的种类及其含量范围为白介素IL-1β:5-15ng/mL,白介素IL-4:5-15ng/mL,干扰素IFN-γ:10-30ng/mL。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述细胞因子IL-1β:10-15ng/mL,IL-4:5-10ng/mL,IFN-γ:15-25ng/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述细胞因子IL-1β:10ng/mL,IL-4:15ng/mL,IFN-γ:15ng/mL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述细胞因子IL-1β:10ng/mL,IL-4:10ng/mL,IFN-γ:20ng/mL。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其特征在于:
所述第一步骤(S1)中,将脐带间充质干细胞(UC-MSCs)在基础培养基中扩增传代,采用3-8代,融合度范围为30-40%的细胞作为所述第一间充质干细胞,
所述基础培养基采用10%胎牛血清、DMEM-F12培养基、10 ng/ml EGF和4 ng/ml bFGF;
所述第二步骤(S2)中,将所述第一间充质干细胞在所述定向培养基中培养72小时,得到第二间充质干细胞。
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