[发明专利]一种兔出血症病毒杆状病毒载体疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种兔出血症病毒杆状病毒载体疫苗及其制备方法，所述的抗原为重组兔出血症杆状病毒VP60蛋白，所述疫苗用于预防兔病毒性出血症。本发明的兔出血症病毒抗原生产采用全悬浮细胞培养技术，生产过程不使用强毒，制备的抗原血凝效价高、免疫原性好、生产工艺先进，可在GMP车间大规模生产；兔出血症病毒杆状病毒载体、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗制备程序更加简单，易于大规模生产和产品质量控制，生物安全性良好，产品质量更优，生产成本进一步降低，按照此方法制备的疫苗安全性更好，免疫攻毒保护率更高，免疫期和保存期也优于现有技术制备的同类疫苗，满足实际应用需求。

技术领域

本发明涉及及动物疫苗技术领域，更具体为一种兔出血症病毒杆状病毒载体疫苗及其制备方法。

背景技术

兔病毒性出血症(Rabbithemorrhagicdiease，RHD)是由兔出血症病毒(Rabbithemorrhagicdiseaseviurs，RHDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病，俗称“兔瘟”。本病常呈暴发性流行，发病率和病死率极高，死亡率高达90％左右。兔多杀性巴氏杆菌病(Pasteurellosis)又称兔出血性败血症 (Hemorrhagicsepticaemia，HS)是由兔多杀性巴氏杆菌 (Pasteurellamultocida，Pm)引起的一种急性、败血性传染病。该病可以分为鼻炎型、肺炎型、中耳炎型等多种病型，各种病型病变不一致，但往往有两种及两种以上病型联合发生。我国分别将兔出血症病毒和巴氏杆菌列为二类病原微生物和三类病原微生物。

兔出血症是严重危害家兔健康养殖的主要疫病，当前的防控措施主要是疫苗免疫。国内虽然已有兔病毒性出血症灭活疫苗，其抗原成分是兔出血症组织毒。但是该疫苗存在有重大缺陷，主要表现在用于制备兔出血症病毒的动物个体差异较大，不利于疫苗抗原的规模化生产，质量控制难以进行，最重要的是疫苗制备过程容易造成强毒扩散，生物安全性差；以上缺陷严重地影响了疫苗质量，制约了企业生产效率。因此，需要提供一种新的技术方案给予解决。

发明内容

本发明的目的在于提供一种兔出血症病毒杆状病毒载体疫苗及其制备方法，该兔出血症病毒抗原生产采用全悬浮细胞培养技术，生产过程不使用强毒，制备的抗原血凝效价高、免疫原性好、生产工艺先进，可在GMP车间大规模生产；兔出血症病毒杆状病毒载体、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗制备程序更加简单，易于大规模生产和产品质量控制，生物安全性良好，产品质量更优，生产成本进一步降低，按照此方法制备的疫苗安全性更好，免疫攻毒保护率更高，免疫期和保存期也优于现有技术制备的同类疫苗，满足实际应用需求。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种兔出血症病毒杆状病毒载体疫苗及其制备方法，包括：抗原和佐剂，其特征在于：所述的抗原为重组兔出血症杆状病毒VP60蛋白，所述疫苗用于预防兔病毒性出血症。

作为本发明的一种优选实施方式，所述兔出血症病毒杆状病毒载体为重组兔出血症病毒VP60杆状病毒BAC-VP60株，保藏编号为：CCTCC V 201833。

作为本发明的一种优选实施方式，所述疫苗是由重组兔出血症杆状病毒 VP60蛋白灭活后制备获得，抗原按每毫升疫苗中含灭活前的VP60蛋白血凝效价不低于1:256的标准进行配苗。

作为本发明的一种优选实施方式，所述疫苗内含有佐剂，且佐剂为氢氧化铝胶，所述佐剂与抗原的比例为1：9。

作为本发明的一种优选实施方式，所述制备方法包括以下步骤：

步骤1：兔病毒性出血症生产用毒种制备：将毒种稀释后接种健康易感染的家兔，无菌采集接种后24～72h濒死或刚死亡的且具有典型病理变化的肝脏组织经检验合格后，保存作为生产用毒种备用；