[发明专利]一种用于从血样中富集和分离循环肿瘤细胞的分离介质及方法

权利要求书

1.一种用于从血样中富集和分离循环肿瘤细胞的分离介质，其特征在于，所述分离介质的制备方法包括以下步骤：

（1）取具有三维框架结构的多孔材料作为基体，

所述多孔材料为泡沫铜、泡沫镍、泡沫铁镍或泡沫铝；

（2）在所述基体表面沉积一层用于增加基体表面粗糙度的功能层，

所述功能层为包含元素铜、金或银的金属单质、合金、金属氧化物或金属氢氧化物；

（3）在功能层表面负载用于将抗循环肿瘤细胞特异性抗原的抗体结合到基体上的结合层，

所述结合层通过氢键、静电吸附或功能蛋白质共价结合方式将抗循环肿瘤细胞特异性抗原的抗体结合到基体上，

步骤（3）中，先在功能层表面沉积明胶与生物素的混合层；再使用链霉亲和素与所述混合层中的生物素结合；最后将偶联有生物素的抗循环肿瘤细胞特异性抗原的抗体与所述链霉亲和素结合，

所述混合层中明胶与生物素的质量比为0.02~0.16∶1；所述基体表面的功能层和结合层两者总厚度为3nm~100nm，

所述多孔材料的孔径大小为5ppi~50ppi。

2.如权利要求1所述的分离介质，其特征在于，所述抗体为抗EGFR抗体、抗MUC-1抗体、抗EGFR-2抗体、抗EpCAM抗体、抗HER2抗体中的至少一种。

3.一种非医学诊断为目的的从血样中富集和分离循环肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（a）使用如权利要求1~2任一所述的分离介质作为过滤介质对血样进行过滤，用于吸附循环肿瘤细胞；

（b）将吸附的循环肿瘤细胞释放；

（c）分离并收集释放后的循环肿瘤细胞。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤（b）中将吸附的循环肿瘤细胞释放时，将吸附循环肿瘤细胞的分离介质作为电解池的电极，通过电解将分离介质中的功能层溶解，释放出吸附在分离介质上的循环肿瘤细胞，其中，所述电解池使用的电解液为PBS磷酸缓冲盐溶液或者生理盐水。