[发明专利]一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中替诺福韦艾拉酚胺浓度的方法

权利要求书

1.一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中替诺福韦艾拉酚胺浓度的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）对血浆样品进行前处理；

（2）采用液相色谱-串联质谱法测定步骤（1）中经前处理后的血浆样品中替诺福韦艾拉酚胺的浓度；

所述液相色谱-串联质谱法包括色谱条件和质谱条件，其中：

所述色谱条件包括：以含0.1%甲酸的2mM醋酸铵水溶液为流动相A，以体积比为1:1的乙腈-甲醇为流动相B；梯度洗脱，洗脱程序为：0-0.3min，10% B相，0.3-1.5 min，10%-95%B相，1.5-4.0min，95% B相，4.0-4.6min，95%-10%B相，4.6-5.5min，10% B相；洗脱时间为5.5min；

所述质谱条件包括：离子源：电喷雾电离正离子检测；喷雾气温度：550℃；雾化气：60psi；加热辅助气：60 psi；气帘气：30 psi；碰撞气：8 psi；喷雾电压：5500 V；扫描时间：100ms；扫描方式：多反应监测；用于定量的离子反应分别为：m/z 477.2 ®346.1（替诺福韦艾拉酚胺）和m/z 482.3®351.2（替诺福韦艾拉酚胺-d5）；碰撞能量60 eV。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，对血浆样品进行前处理的方法为：向100 µL血浆样品中加入50 µL内标溶液，再加入300 µL乙腈，涡流振荡5min，4℃条件下以3900 rpm速度离心10 min，取上清液100 µL加入300 µL去离子水，混匀后，取20.0 µL进行LC-MS/MS分析。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述内标溶液为50 ng/mL的替诺福韦艾拉酚胺-d5溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述色谱条件还包括：分析柱为Eclipse Plus C18色谱柱，流速：0.65mL/min；进样量：20.0 µL。