[发明专利]一种川贝母类圆球茎的诱导培养方法

权利要求书

1.一种川贝母类圆球茎的诱导培养方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)愈伤组织的诱导培养：选取川贝母组培苗上生长的地上茎作为外植体，切取后将其正接于愈伤组织诱导培养基MS+KT0.5～1.0mg·L^-1+2,4-D0.5～1.5mg·L^-1+NAA0.5～1.0mg·L^-1+琼脂6.5～7.0g·L^-1中，先在温度为5～8℃、无光照的条件下培养7天，再转放在温度为18～22℃、无光照的条件下进行愈伤组织的诱导培养；

(2)类圆球茎的诱导培养：选取步骤(1)中游离在培养基表面的地上茎上端产生的质地疏松、颜色为黄白色的愈伤组织，按0.4～0.8g的质量大小接入改良B5+6-BA1.0～3.0mg·L^-1+NAA0.1～0.5mg·L^-1+尿素1.0～3.0g·L^-1+琼脂3.0～5.0g·L^-1的类圆球茎诱导培养基中，在培养温度为16～20℃、每天光照3～6小时、光照强度为400～800lx的条件下进行类圆球茎的诱导培养；所述改良B5的肌醇改为50mg·L^-1；

(3)类圆球茎的增殖培养：选取步骤(2)中诱导出的直径为0.2～0.4cm的白色、圆形类圆球茎，以1.0～2.0g/100mL的接种量接入类圆球茎增殖培养基MS+6-BA1.0～3.0mg·L^-1+NAA0.1～0.5mg·L^-1+腺嘌呤10～30mg·L^-1+活性炭1.0～3.0g·L^-1中，在培养温度为20～25℃、每天光照6～10小时、光照强度1000～1500lx、每分钟振荡8～12次的条件下进行振荡培养；

上述所有培养基的pH值为5.8～6.2，蔗糖10～20g·L^-1。

2.根据权利要求1所述的川贝母类圆球茎的诱导培养方法，其特征在于：步骤(1)中地上茎的切取长度为1.0～2.0cm。

3.根据权利要求1所述的川贝母类圆球茎的诱导培养方法，其特征在于：步骤(1)中所述正接是指将地上茎形态学下端插入愈伤组织诱导培养基，形态学上端游离在愈伤组织诱导培养基表面。