[发明专利]利用木糖生产原人参二醇的重组解脂耶氏酵母菌株及构建方法和应用

权利要求书

1.一种利用木糖生产原人参二醇的重组解脂耶氏酵母菌的构建方法；其特征是包括如下步骤：

(1)将优化的木糖代谢基因木糖还原酶基因XYL1表达盒和木糖醇脱氢酶基因XYL2表达盒，以及内源的木酮糖激酶基因XKS表达盒，同时导入解脂耶氏酵母，得到重组菌1；

木糖还原酶基因XYL1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

木糖醇脱氢酶基因XYL2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

木酮糖激酶基因XKS的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

(2)向所述重组解脂耶氏酵母菌1中导入优化的达玛烯二醇合酶编码基因DS表达盒、优化的原人参二醇合酶编码基因PPDS表达盒和优化的细胞色素-NADPH-还原酶1的编码基因表达盒，得到重组解脂耶氏酵母菌2；

所述优化的达玛烯二醇合酶编码基因DS的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

所述优化的原人参二醇合酶编码基因PPDS的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述优化的细胞色素-NADPH-还原酶1编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

(3)向所述重组解脂耶氏酵母菌2中导入截短5'端1500个核苷酸的编码3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因tHMG1表达盒，法呢基焦磷酸合酶基因ERG20表达盒，鲨烯合酶的编码基因ERG9表达盒，得到重组解脂耶氏酵母菌3；

所述编码截短5'端1500个核苷酸的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因tHMG1的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述法呢基焦磷酸合酶基因ERG20的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；

所述鲨烯合酶基因ERG9的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

2.利用权利要求1的方法构建的利用木糖生产原人参二醇的重组解脂耶氏菌。

3.利用权利要求2构建的重组解脂耶氏菌发酵生产原人参二醇的应用。