[发明专利]一种玉波二号葡萄组培快繁的方法

权利要求书

1.一种‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于包括以下步骤：采集‘玉波二号’葡萄当年生茎段，依次进行（1）外植体培养、（2）外植体消毒、（3）初代培养、（4）继代培养、（5）生根培养、（6）移栽炼苗，得到‘玉波二号’葡萄组培苗。

2.根据权利要求1所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（1）外植体培养中，采集‘玉波二号’葡萄当年生茎段，选择生长健壮无病虫害的母树，在春天3月份取1年生枝条，要求每个茎段都长有健康腋芽，将枝条放置25℃的温室内进行水培，水培为每升水含有30g蔗糖，每隔3d换一次水并剪掉旧剪口，使茎段萌发新芽。

3.根据权利要求2所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（2）外植体消毒中，当水培的一年生枝条上的芽抽生至1.5～2.0cm时，剪取所述（1）中腋芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗6～8h，用75％酒精处理8s，0.1％升汞处理7min；然后用超声波清洗机清洗3min，无菌水冲洗3～4次。

4.根据权利要求3所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（3）初代培养中，将消毒后的腋芽接种到初代培养基上进行初代培养，然后放置在光照12h/d、光照强度3000 lux，26℃条件下进行培养，培养25～30天左右至形成若干不定芽丛；所述初代培养基具体为MS培养基、6-BA 0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂8g/L。

5.根据权利要求1所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（4）继代培养中：切取步骤（3）中初代培养后的茎段，转接至继代培养基上，进行继代扩繁培养；继代培养周期为2～3个周期，每个周期的时长为25～30天；所述继代培养基具体为MS培养基、IBA0.1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂8g/L；。

6.根据权利要求1所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（5）生根培养中：切取步骤（4）中继代培养后生长健壮的单芽幼苗，接种到生根培养基上，诱导生根并进行生根炼苗培养；所述生根培养基为1/2MS、IBA 0.5 mg/L、蔗糖15g/L，琼脂8g/L。

7.根据权利要求1所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述（6）移栽炼苗中：步骤（5）中生根的葡萄组培苗根长度达到2cm后，置于室外遮阴炼苗10～15天继续生长，然后将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗2～4天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓度为0.1％多菌灵溶液中浸泡5min，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗2～3次，然后移栽到以纯锯末为基质的营养钵中；移栽苗的管理方式为：移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持基质湿润透气；待生根苗抽生出新芽之后即移出遮阴网，得到‘玉波二号’葡萄组培苗。

8.根据权利要求1所述‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤（3）初代培养、（4）继代培养和（5）生根培养中：光照强度为3000 lux，光照10h～12h，温度为25℃±2℃；炼苗时环境条件为：温度25～30℃，光照强度为5000～10000Lx，光照时间为自然光照时长。