[发明专利]一种玉波二号葡萄组培快繁的方法

说明书

本发明提供一种玉波二号’葡萄组培快繁的方法，包括外植体培养、外植体消毒、初代培养、继代培养、生根培养、移栽炼苗，得到‘玉波二号’葡萄组培苗。本发明的方法用组织培养法繁殖‘玉波二号’葡萄，快速生产‘玉波二号’葡萄脱毒种苗，实现工厂化育苗和脱毒苗木快速繁殖，可达到优良葡萄快速育苗的目的，以满足生产需要。同时使用组培快繁技术，可周年试验或生产，生长快，周期短，重复性强，缩短了苗木繁殖周期，加快‘玉波二号’葡萄新品种的推广应用。

技术领域

本发明属于葡萄组培领域，具体涉及一种‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法。

背景技术

葡萄是世界上栽培最早、分布最广的果树之一，与苹果、柑桔和香蕉并称为世界四大水果。随着我国果树产业的发展，葡萄已经成为发展速度最快、经济效益最好的果树种类之一。我国葡萄总产量、鲜食葡萄栽培面积和产量已连续多年雄居世界首位，成为名副其实的世界葡萄产业大国。但是葡萄栽培生产过程中，无病毒优质良种苗木繁育体系建设滞后和苗木生产管理不规范是当前中国葡萄产业发展中的突出问题，以致苗木质量参差不齐、标准化低、带毒带病苗偏多、品种纯度难以保证。葡萄常规繁殖多采用嫁接和扦插，但这两种繁殖方式易造成病毒积累，同时繁殖时间受季节限制。组织培养在葡萄快速繁殖中应用较为广泛，其优点不仅可以加快繁殖速度，而且还可以热处理结合茎尖培养，有效地消除病毒，获得无毒苗木。葡萄的组培快繁可有效解决葡萄繁殖的技术难题，已在葡萄的繁殖上成熟应用。

‘玉波二号’葡萄是山东省江北葡萄研究所以‘紫地球’ב达米娜’选育的是中晚熟鲜食葡萄，具有大粒、优质、丰产、抗逆、具有玫瑰香味等优点，并于2017年顺利通过山东省林木品种审定委员会审定，被山东省林业厅认定为林木良种，为了加快新品种的推广，本发明建立‘玉波二号’葡萄无病毒优质良种苗木繁育体系，实现种苗生产的有序性、规范化和规模化，实施苗木无毒化和标准化，保证葡萄苗木质量、纯度，控制检疫性病虫害蔓延扩散，促进脱毒嫁接苗木的推广和普及。

发明内容

本发明的目的在于提供一种‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，实现‘玉波二号’葡萄种苗生产的标准化、无毒化和规模化。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种‘玉波二号’葡萄组培快繁的方法，包括如下步骤：

采集‘玉波二号’葡萄当年生茎段，依次进行（1）外植体培养、（2）外植体消毒、（3）初代培养、（4）继代培养、（5）生根培养、（6）移栽炼苗，得到‘玉波二号’葡萄组培苗。

进一步地，所述初代培养基具体为MS培养基、6-BA 0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂8g/L；所述继代培养基具体为MS培养基、IBA 0.1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂8g/L；，所述生根培养基为1/2MS、IBA 0.5 mg/L、蔗糖15g/L，琼脂8g/L。

进一步地，所述（1）中外植体培养，采集‘玉波二号’葡萄当年生茎段，在春天3月份取1年生枝条，要求每个茎段都长有健康腋芽，将枝条放置25℃的温室内进行水培，水培为每升水含有30g蔗糖，每隔3d换一次水并剪掉旧剪口，使茎段萌发新芽。

进一步地，所述（2）外植体消毒，剪取所述（1）中腋芽在自来水下冲洗6～8h，用75％酒精处理8s，0.1％升汞处理7min；然后用超声波清洗机清洗3min，无菌水冲洗3～4次。

进一步地，所述（3）中初代培养，将消毒后的腋芽接种到初代培养基上进行初代培养，培养25～30天左右至形成若干不定芽丛。

进一步地，所述（4）中继代培养：切取步骤（3）中初代培养后的茎段，转接至继代培养基上，进行继代扩繁培养；继代培养周期为2～3个周期，每个周期的时长为25～30天。

进一步地，所述（5）生根培养：切取步骤（4）中继代培养后生长健壮的单芽幼苗，接种到生根培养基上，诱导生根并进行生根炼苗培养。