[发明专利]一种(R)-3-羟基丁酸的制备方法

权利要求书

1.一种(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：

以聚-β-羟丁酸为底物，按质量比2～2.2％的比例加入活化的菌，得到混合酶液，将上述混合酶液接入扩增培养基中，静置培养1h，替换60％体积的扩增培养基，在溶氧3.0～3.2mg/L、温度32～35℃的条件下，培养20～24h，每3h替换60％体积的扩增培养基；扩增后的混合酶液，按1:2的体积比加入发酵培养基，在溶氧4.5～4.8mg/L、温度28～32℃的条件下进行好氧发酵，发酵过程中补入O₂和CO₂，培养40～72h，即得。

2.根据权利要求1所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于所述的活化的菌为枯草芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌、乳酸发酵短杆。

3.根据权利要求2所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于所述的活化的菌优选为谷氨酸棒杆菌。

4.根据权利要求1所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于所述的扩增培养基为：酵母粉4～6g/L，蛋白胨8～10g/L，氯化钠8～10g/L，微量元素溶液1～1.2ml/L，pH为7.2～7.3。

5.根据权利要求4所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于扩增培养基中，所述的微量元素溶液含有：硫酸锰1.4g/L、乙二胺四乙酸二钠1.0g/L、硼酸0.8g/L、硫酸铜0.2g/L、硫酸锌0.2g/L、硅酸钠0.2g/L、氯化钴0.1g/L、钼酸钠0.05g/L、硫酸镍0.05g/L。

6.根据权利要求1所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于所述的发酵培养基为：4～4.5g/L亚磷酸二氢钾、3.5～3.6g/L硫酸铵、1.2～1.3g/L硫酸镁、2～2.2g/L氯化铵、1～1.2g/L柠檬酸、0.090～0.11g/L氨苄青霉素、40～45g/L葡萄糖和1～1.2ml/L微量元素溶液，pH为6.9～7.0。

7.根据权利要求6所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于发酵培养基中，所述的微量元素溶液含有：三氯化铬0.8g/L、硫酸铁0.5g/L、氯化钴0.3g/L、氯化钙0.1g/L、硫酸锌0.1g/L、硫酸铜0.06g/L、硫酸锰0.03g/L。

8.根据权利要求1所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于发酵过程补入O₂和CO₂的比例为1:6～8。

9.根据权利要求1所述的(R)-3-羟基丁酸的制备方法，其特征在于后处理步骤为：将所得发酵液，以2000～3000rpm离心10min，弃去沉淀，上清液经0.45μm的过滤器过滤后，再与活性炭混合搅拌20min，加入5kD超滤管，3200rpm离心60min，取滤液，通过阳离子交换树脂，交换后，收集油状物。