[发明专利]一种基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法及应用

说明书

本发明涉及基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法及应用，可实现对肿瘤细胞和TME同时调节，为化疗‑免疫治疗提供药物新途径，方法是，合成靶向性前药的透明质酸@R，再将其马来酰亚胺化；其次，将马来酰亚胺化后的前药通过基质金属蛋白酶敏感肽与pH敏感嵌段聚（β‑氨基酯）连接，形成具有pH/MMP双敏感的嵌段，通过自组装包裹免疫调节剂，得基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束，本发明制备方法简便，原料易得，生产费用低，具有TME高度的响应性，集化疗和免疫治疗为一体，能够把有效的将药物递送至相应的靶部位，显著的提高治疗效果，为化疗‑免疫治疗提供新药物，经济和社会效益巨大。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，涉及高效响应肿瘤微环境的一种基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法及应用。

背景技术

肿瘤的发生与发展是肿瘤细胞和肿瘤微环境（TME）相互作用的结果，传统的单一治疗模式通常无法满足临床治疗的需要。传统的化疗一般针对于肿瘤细胞，却忽略了对TME的改善，将化疗和免疫治疗相结合将大大提高抗肿瘤治疗效果。

纳米技术的发展为药物联用产生协同抗肿瘤作用带来了新的机遇。然而传统的纳米给药系统一般共递送药物至肿瘤细胞或无差别的进入多种细胞，不仅不能发挥药物联用的最大效果，还可能导致TME的恶化，为肿瘤逃避免疫系统的识别和攻击提供多种途径。肿瘤组织存在着区别于其他正常组织的特征，如：低pH（pH6.4-6.8），高表达基质金属蛋白酶（MMPs）包括MMP-2、MMP-9，高表达CD44受体等。因此，基于肿瘤微环境特征设计一种“拆卸式”纳米粒递送不同药物至相应的靶部位，精准靶向肿瘤细胞的同时，高度对TME进行调节将为抗肿瘤治疗提供新的治疗途径。

聚（β-氨基酯）[poly(β-amino esters)，缩写为PAE或PBAE，本发明中采用PAE]是一类被广泛研究的pH敏感材料，当处于微酸环境中（pH6.4-6.8），结构能够发生质子化，由疏水性向亲水性的转变，且具有较好的生物相容性。此外，一些MMP敏感肽可以被TME中高表达MMP-2或MMP-9进行剪切。因此，将PAE与MMP敏感肽相结合将大大提高纳米系统对微环境的响应能力。透明质酸（HA）是一种无毒，可生物降解的天然酸性多糖，对CD44受体具有很强的亲和力，常用作肿瘤靶向的配体，通过与药物结合形成前药，不仅能够将药物精准递送至肿瘤细胞，提高疗效的，还能够减少对免疫效应细胞的杀伤。因此，将HA作为亲水性部分，并通过MMP敏感肽与PAE相连，通过自组装形成pH/MMP双响应纳米胶束，能够高度响应TME。

蒽环类药物如阿霉素，紫杉醇等，能够导致细胞免疫原性死亡（ICD），释放出肿瘤相关抗原（TAAs），增加肿瘤免疫原性。通过将蒽环类药物与HA相连接形成前药，不仅能够提高肿瘤细胞发生ICD的效率，避免了对免疫效应细胞的损伤。一些免疫调节剂如塞来昔布、NLG919、GW3965等，能够改善TME，为抗肿瘤免疫效应的产生提供有利的条件。因此，将蒽环类药物与HA形成前药，免疫调节剂负载于纳米胶束的疏水性内核中，当纳米胶束到达肿瘤部位时，在低pH和MMP的作用下释放出HA前药和免疫调节剂，HA前药精准靶向肿瘤细胞，免疫调节剂作用于TME，实现对不同药物的精准递送，放大两药联用的抗肿瘤效果。

发明内容

针对上述情况，本发明的目的是提供一种基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法及应用，可实现对肿瘤细胞和TME同时调节，为化疗-免疫治疗提供药物新途径。本发明制备的“可解离”纳米胶束通过响应于TME释放出前药和免疫调节剂，前药精准靶向肿瘤细胞，提高作用效果，同时免疫调节剂对TME进行改善，显著提高药物协同作用效果，为不同靶点药物的联合使用提供了技术支持。

为达到上述目的，一种基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法，首先，合成靶向性前药的透明质酸@R，再将其马来酰亚胺化；其次，将马来酰亚胺化后的前药通过基质金属蛋白酶敏感肽与pH敏感嵌段聚（β-氨基酯）连接，形成具有pH/MMP双敏感的嵌段，通过自组装包裹免疫调节剂，得基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束，具体步骤如下：