[发明专利]一种青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法

权利要求书

1.一种青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、对种子进行催芽处理，选择发芽的种子，并采用蒸馏水对其进行水培处理；

步骤二、将具有2-3片叶的植株放入营养液中进行水培处理，处理时间为一周，保持营养液的pH为5.5-6.5；

步骤三、将部分步骤二所得植株移入缺氮营养液中胁迫处理，胁迫处理时间为两周，剩余步骤二所得植株使用正常营养液培养两周；

步骤四、将步骤三所得植株进行地上生物量的测定。

2.如权利要求1所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，还包括步骤五、取步骤三所得植株叶片样本，用试剂盒检测丙二醛的含量。

3.如权利要求1所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，步骤一中，所述催芽处理包括，用高锰酸钾液浸泡处理种子10-20min，然后用蒸馏水漂洗，将洗净的种子置于20-30℃，黑暗环境中，培养2-3天。

4.如权利要求1所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，步骤二中，所述营养液为改良霍格兰营养液，其包括以下浓度的组分：

5.如权利要求4所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，所述铁盐溶液的制备方法为，称取2.78g七水硫酸亚铁和3.73g乙二胺四乙酸二钠，加水定容至500ml，调节pH为5.5。

6.如权利要求1所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，步骤三中，所述缺氮营养液包括以下浓度的组分：

7.如权利要求6所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，所述铁盐溶液的制备方法为，称取2.78g七水硫酸亚铁和3.73g乙二胺四乙酸二钠，加水定容至500ml，调节pH为5.5。

8.如权利要求1所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，步骤四中，所述地上生物量的测定包括，将地上生物量分别取样三个相同总量的样本，先在120℃下杀青，然后在80℃下烘干至恒重，分别称量干燥后的重量。

9.如权利要求2所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，所述试剂盒为Solarbio，货号为BC0025，规格100T/96S。

10.如权利要求9所述的青稞苗耐贫瘠性的筛选鉴定方法，其特征在于，所述试剂盒检测丙二醛的含量包括如下步骤：

步骤一、称取约0.1g组织，加入1ml提取液进行冰浴匀浆，在8000G、4℃下离心10min，取上清液，置于冰上待测；

步骤二、取测定管和空白管，向测定管中依次加入300μLMDA检测工作液、100μL步骤一所得上清液、100μL试剂三，向空白管中依次加入300μLMDA检测工作液、100μL蒸馏水、100μL试剂三，将测定管和空白管密封并放置在100℃水浴中保温60min，再置于冰浴中冷却至常温，分别在10000G、常温下离心10min，吸取200μL上清液于微量玻璃比色皿或96孔板中，测定各样品在450nm、532nm和600nm处的吸光度；

步骤三、分别计算ΔA450＝A450(测定)-A450(空白)、ΔA532＝A532(测定)-A532(空白)、ΔA600＝A600(测定)-A600(空白)；

步骤四、若测定在96孔板中进行，则按照MDA含量(nmol/g鲜重)＝5×(12.9×(ΔA532-ΔA600)-1.12×ΔA450)÷W计算，若测定在微量玻璃比色皿中进行，则按照MDA含量(nmol/g鲜重)＝5×(6.45×(ΔA532-ΔA600)-0.56×ΔA450)÷W计算，其中W为样品质量，单位为g。