[发明专利]一种芋茎尖超低温保存方法在审
申请号: | 202010434693.0 | 申请日: | 2020-05-21 |
公开(公告)号: | CN113693060A | 公开(公告)日: | 2021-11-26 |
发明(设计)人: | 张金梅;陈晓玲;辛霞;卢新雄;尹广鹍;何娟娟 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | A01N3/00 | 分类号: | A01N3/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 魏少伟 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芋茎尖 超低温 保存 方法 | ||
1.一种芋茎尖超低温保存方法,包括:利用含有还原型谷胱甘肽的预培养液对芋茎尖进行预处理,得到预处理的芋茎尖;将所述预处理的芋茎尖于超低温环境中保存,实现芋茎尖的超低温保存。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述预培养液由溶质和溶剂组成,所述溶剂为MS液体培养基,所述溶质及其在所述预培养液中的浓度分别为0.1-0.2mmol/L还原型谷胱甘肽和0.3mol/L蔗糖。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述预处理在黑暗中进行;和/或,所述预处理的时间为2天。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:将所述预处理的芋茎尖于超低温环境中保存包括:
a1)将所述预处理的芋茎尖利用装载液进行处理,得到装载液处理的芋茎尖;所述装载液由溶质和溶剂组成,所述溶剂为MS液体培养基,所述溶质及其在所述装载液中的浓度分别为2.0mol/L甘油和0.4mol/L蔗糖;
a2)将所述装载液处理的芋茎尖于超低温环境中保存,实现芋茎尖的超低温保存。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:将所述预处理的芋茎尖利用装载液进行处理的时间为20分钟。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于:步骤a2)包括:
a21)将所述装载液处理的芋茎尖利用PVS2玻璃化保护剂处理,得到保护剂处理的芋茎尖;所述PVS2玻璃化保护剂由溶质和溶剂组成,所述溶剂为MS液体培养基,所述溶质及其在所述PVS2玻璃化保护剂中的浓度分别为3.26mol/L甘油、2.42mol/L乙二醇、1.9mol/L二甲基亚砜和0.4mol/L蔗糖;
a22)将所述保护剂处理的芋茎尖于超低温环境中保存,实现芋茎尖的超低温保存。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:将所述装载液处理的芋茎尖利用PVS2玻璃化保护剂处理的时间为40分钟;
和/或,将所述装载液处理的芋茎尖利用PVS2玻璃化保护剂处理在0℃下进行。
8.成套试剂,包括权利要求1或2中所述预培养液。
9.根据权利要求8所述的成套试剂,其特征在于:所述成套试剂还包括权利要求4中所述装载液和/或权利要求6中所述PVS2玻璃化保护剂。
10.权利要求8或9所述的成套试剂在芋茎尖超低温保存中的应用;
或,权利要求8或9所述的成套试剂在制备芋茎尖超低温保存产品中的应用。
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