[发明专利]一种提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法有效
| 申请号： | 202010434937.5 | 申请日： | 2020-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN111763688B | 公开（公告）日： | 2022-06-24 |
| 发明（设计）人： | 张大伟;林宏辉;易克贤;杨峰 | 申请（专利权）人： | 四川大学;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/82 |
| 代理公司： | 成都鱼爪智云知识产权代理有限公司 51308 | 代理人： | 代述波 |
| 地址： | 610065 四川省成都市武侯区一环路*** | 国省代码： | 四川;51 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 经济作物 黄瓜花叶病毒 抗性 方法 | ||
1.一种提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)于1/2MS平板或土壤中，光照培养作物16h后，再暗培养作物8h；
(2)将构建得到的过表达载体Flag-HA-WRKY30OX转入步骤(1)培育得到的植物材料的愈伤组织中；所述过表达载体Flag-HA-WRKY30OX为含有35S启动子驱动的过表达载体Flag-HA-WRKY30OX；
(3)继代2～3次后，提取总RNA，并筛选出成功转入WRKY30OX的植株进行培养即可；
所述作物为烟草、油菜或西蓝花。
2.根据权利要求1所述的提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法，其特征在于，所述WRKY30基因的核苷酸序列在Genbank中的编号位置为AT5G24110。
3.根据权利要求1所述的提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法，其特征在于，步骤(3)通过RT-PCR鉴定作物中WRKY30基因的表达情况，并筛选出成功转入WRKY30OX的植株。
4.根据权利要求3所述的提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法，其特征在于，所述RT-PCR的反应体系包括：2μL 10×PCR Buffer、1.6μL DNTPs(2.5mM)、1.2μL L-primer(100pmol/μL)、1.2μL R-primer(100pmol/μL)、0.2μL TaqDNA Polymerase(3U/μL)、1μLcDNA，最后用ddH2O补足至20μL。
5.根据权利要求3所述的提高经济作物对黄瓜花叶病毒抗性的方法，其特征在于，所述RT-PCR的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性1min；51℃退火30s；72℃延伸30s；共30个循环，最后72℃延伸10min。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于四川大学;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，未经四川大学;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010434937.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
