[发明专利]对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒鉴别诊断的基因芯片以及检测方法

权利要求书

1.一种试剂盒，其包括：

基因芯片，其是用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒进行鉴别的基因芯片，其中，该基因芯片包括：用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒进行鉴别的探针组合物，以及载体材料，所述探针组合物固定在载体材料上；该探针组合物的组成为：

针对猪瘟野毒的探针CSFV-W-P，其序列如SEQ ID NO.1：CCCTGGGTGGTCTAAGTCCTGAGTACAG所示，

针对猪瘟疫苗的探针CSFV-V-P，其序列如SEQ ID NO.2：ATGCAGGAGGAGATAACCTTGCAGCC所示，

针对非洲猪瘟病毒的探针ASFV-P，其序列如SEQ ID NO.3：TCACTACGGCTGATCTTGTGG所示，以及

针对猪非典型瘟病毒的探针APPV-P，其序列如SEQ ID NO.4：ATGCCCACGTCCACCCAAGCC所示；

所述基因芯片的载体材料为改性硅胶膜；

除了固定有上面4条靶标探针序列，所述基因芯片的每个孔还固定有一条芯片反应质控探针和两条PCR反应质控探针；

所述试剂盒还包括引物组合物，其是对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒进行鉴别时所使用的扩增引物，其包括：

针对猪瘟野毒CSFV-W的5’UTR保守区域设计引物，分别为CSFV-F1：SEQ ID NO.5：GGAGGGACTAGCCRTAGTG和CSFV-R1：SEQ ID NO.6：ACGTCGAACTACTGACGACTG；

针对猪瘟疫苗CSFV-V的NS5B保守区域设计引物，分别为CSFV-F2：SEQ ID NO.7：CCTTCGGGGAGAAAGTAACGAT和CSFV-R2：SEQ ID NO.8：CCTACCACAGTCACGGCT；

针对非洲猪瘟病毒ASFV的p72保守区域设计引物，分别为ASFV-F：SEQ ID NO.9：TTTTATATTAGTTGGGACACGGA和ASFV-R：SEQ ID NO.10：GAAAGTTAATAGCAGATGCCGAT；以及

针对猪非典型瘟病毒APPV的5’UTR保守区域设计引物，分别为APPV-F：SEQ ID NO.11：CAGACGTCACCGAGTAGTACACC和APPV-R：SEQ ID NO.12：CCCAGGTCCACCACCGAT；

所述试剂盒用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒、猪非典型瘟病毒进行鉴别诊断。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其还包括：

质控引物、质控质粒、阳性对照、阴性对照、热反应酶、无菌无核酸酶水、辣根过氧化物酶、变性液A、洗脱液B、洗涤液C以及TMB显色液。