[发明专利]一种利用糯玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的培养方法

权利要求书

1.一种利用糯玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的培养方法，包括以下步骤：

1)选取外植体

取授粉9-14天的糯玉米幼穗，除去包叶、消毒，挑取幼胚作为外植体；

2)诱导愈伤组织

将外植体接种至愈伤组织诱导培养基中进行诱导培养，培养7-10天后盾片膨大，及时去芽及根状体；诱导培养15天后挑选色泽淡黄、结构致密、生长旺盛的愈伤组织进行继代培养，每15-20天继代1次，继代2-3次获得胚性愈伤组织；

3)分化培养

将胚性愈伤组织转移至分化培养基中进行培养，每15-20天继代1次，直至获得分化再生苗；

所述步骤2)中，愈伤组织诱导培养基，其各成分及含量为：

N6盐4g/L、AgNO₃ 0.85mg/L、N6维生素1ml/L、谷氨酰胺300mg/L、MES 500mg/L、水解酪蛋白500mg/L、2,4-D 1.5mg/L、脯氨酸1400mg/L、蔗糖30g/L和植物凝胶3g/L，pH＝5.8；

所述步骤2)中的诱导培养在植物组织培养室光照条件下进行，培养条件为：温度26℃，光照强度2000lux，光照时间16h/天；

所述步骤3)中，分化培养基的各成分及含量为：

MS盐4.3g/L、MS维生素1ml/L、谷氨酰胺300mg/L、MES 500mg/L、水解酪蛋白500mg/L、2,4-D 1mg/L和6-BA 1mg/L；

所述糯玉米品种为糯玉米自交系SWL01。

2.根据权利要求1所述利用糯玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的培养方法，其特征在于，步骤1)中，所述幼胚长度为0.8-1.2mm。

3.根据权利要求1所述利用糯玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的培养方法，其特征在于，步骤1)中的消毒方法为：将除去包叶的幼穗置于70％-75％酒精中浸泡10-20min进行消毒。

4.根据权利要求1所述利用糯玉米幼胚诱导胚性愈伤组织的培养方法，其特征在于，还包括以下步骤：

4)生根培养及炼苗

将长至3-5cm的分化再生苗转移至生根培养基中进行培养，获得生根苗；生根苗的根长为2-3cm时，去掉培养瓶的封口膜炼苗，再洗净生根苗上的培养基、移栽。