[发明专利]一种利用基于树莓状金基底的拉曼仪检测鸭肉中残留抗生素的方法

权利要求书

1.一种利用基于树莓状金基底的拉曼仪检测鸭肉中残留抗生素的方法，其特征在于，步骤如下：

1)、制备树莓状金溶胶：采用柠檬酸钠还原硝酸银得到银纳米溶胶作为种子溶液备用；以十六烷基三甲基溴化铵溶液、氯金酸、超纯水，混匀后加入L-抗坏血酸溶液，摇匀，混合溶液由淡黄色变为无色作为生长液；将银种子溶液加入生长液中反应，得到表面粗糙、部分空心的树莓状金溶胶；

2)、鸭肉预处理：剔膜鸭肉与乙酸乙酯混合涡旋、超声、离心后取上清液，残留物重复提取一次，将两次提取得到的上清液合并，加入正己烷和二氯甲烷涡旋、离心，加热至干，再用丙酮定容，最后用有机滤膜过滤得到鸭肉提取液；

3)、标准溶液的SERS检测：将配制的待测呋喃西林、呋喃妥因标准液分别与树莓状金基底混合并滴加在硅片上，用激发光源为785nm的激光拉曼光谱仪进行扫描，分别得到呋喃西林和呋喃妥因标准溶液的SERS光谱图；

4)、模拟液的SERS检测：取呋喃西林、呋喃妥因分别加入至鸭肉提取液中，配制多组梯度浓度系列的呋喃西林鸭肉提取液、呋喃妥因鸭肉提取液作为模拟液，将模拟液与树莓状金溶胶基底混合并滴加在硅片上，用激发光源为785nm的激光拉曼光谱仪进行扫描，得到该系列浓度范围的SERS光谱图；然后分别与呋喃西林标准溶液、呋喃妥因标准溶液的SERS谱图的主要特征峰进行对比指认，同时计算模拟液的SERS峰积分强度与呋喃西林、呋喃妥因浓度之间的线性关系，判断检测范围和下限。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)鸭肉预处理步骤如下：

用分析天平称取5g搅碎的剔膜鸭肉放入50mL离心管中，加入20mL乙酸乙酯涡旋1min，超声振荡10min，再用离心机4000r/min离心10min后取上清液，离心管中的残留物按上述步骤再重复提取一次，将两次提取得到的上清液合并；

取10mL提取液，加入15mL正己烷和15mL二氯甲烷涡旋2min，用离心机4000r/min离心10min，60℃水浴加热至干，再用10mL丙酮定容，最后用0.45μm有机滤膜过滤得到鸭肉提取液。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)标准溶液的SERS检测步骤如下：

用分析天平称取10mg呋喃西林置于50mL烧杯中，加入丙酮用玻璃棒搅拌，取100mL容量瓶定容至100mg/L；用分析天平称取10mg呋喃妥因置于50mL烧杯中，加入丙酮用玻璃棒搅拌，取100mL容量瓶定容至100mg/L；

分别取0.05mL呋喃西林标准溶液、呋喃妥因标准溶液于5mL试管中，向其中滴加0.05mL树莓状金溶胶振荡、摇匀后滴加在硅片上，待混合液风干后再滴加0.05mL的树莓状金溶胶；用激发光源为785nm的激光拉曼光谱仪扫描呋喃西林、呋喃妥因标准溶液，扫描时间为5-20s，得到呋喃西林、呋喃妥因标准溶液的SERS光谱图；

确定呋喃西林的特征峰为1551cm^-1，1473cm^-1，1343cm^-1，1234cm^-1，1174cm^-1，1015cm^-1，962cm^-1；

确定呋喃妥因的特征峰为1600cm^-1，1488cm^-1，1339cm^-1，1256cm^-1，1182cm^-1，1019cm^-1，968cm^-1。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤4)模拟液的SERS检测步骤如下：

用分析天平称取10mg呋喃西林，取100mL容量瓶加入鸭肉提取液定容至100mg/L，用丙酮溶液将呋喃西林鸭肉提取液依次稀释到10mg/L，5mg/L，1mg/L，0.1mg/L，0.05mg/L；用分析天平称取10mg呋喃妥因，取100mL容量瓶加入鸭肉提取液定容至100mg/L，用丙酮溶液将呋喃妥因鸭肉提取液依次稀释到10mg/L，5mg/L，1mg/L，0.1mg/L，0.05mg/L；

分别取0.05mL呋喃西林鸭肉提取液、呋喃妥因鸭肉提取液于5mL试管中，向其中滴加0.05mL树莓状金溶胶振荡、摇匀后滴加在硅片上，待混合液风干后再滴加0.05mL的树莓状金溶胶；用激发光源为785nm的激光拉曼光谱仪进行扫描，扫描时间为5-20s；

扫描呋喃西林鸭肉提取液，得到浓度范围在0.05～10mg/L呋喃西林鸭肉提取液的SERS光谱图，比对呋喃西林鸭肉提取液的SERS光谱图与呋喃西林标准溶液的SERS光谱图的主要特征峰匹配，且在1343cm^-1处峰的SERS信号强度与鸭肉中呋喃西林的浓度存在良好的线性关系，检测限为0.05mg/L；

扫描呋喃妥因鸭肉提取液，得到浓度范围在0.05～10mg/L呋喃妥因鸭肉提取液的SERS光谱图，比对呋喃妥因鸭肉提取液的SERS光谱图与呋喃妥因标准溶液的SERS光谱图的主要特征峰匹配，且在1600cm^-1处峰的SERS信号强度与鸭肉中呋喃妥因的浓度存在良好的线性关系，检测限为0.05mg/L。