[发明专利]用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型、构建方法及应用在审
申请号: | 202010447762.1 | 申请日: | 2020-05-25 |
公开(公告)号: | CN111642457A | 公开(公告)日: | 2020-09-11 |
发明(设计)人: | 宋刚;杜然浩;廖帅雄;董玮仲;张雪;王颖;赖明航;张华明;苗伟杰;陈雪莲;罗炯;彭莉;刘斌 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A61D1/00;A61D7/00;A61K31/137;A61K31/4164;A61K31/43;A61K31/7036;A61K38/14 |
代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 陈炳萍 |
地址: | 400700*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 甲基 苯丙胺 干预 无菌 大鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,所述用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法包括以下步骤:
步骤一,对用于构建用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的大鼠进行预处理;
步骤二,利用步骤一预处理得到的大鼠构建用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型。
2.如权利要求1所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤一中,所述对用于构建用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的大鼠进行预处理的方法包括:
(1)注射10%水合氯醛380mg/kg;
(2)通过立体定位仪经孔垂直入4mm,置于海马CA1区,推入Aβ1-405μl;
(3)静置5min。
3.如权利要求2所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,所述推入Aβ1-40之前,将Aβ1-40溶于灭菌双蒸水3nmol/μL,用前37℃下孵育1周。
4.如权利要求1所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤二中,所述用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法如下:
1)加入0.5g/L万古霉素、1g/L硫酸新霉素、1g/L甲硝唑和1g/L氨苄西林,口服28d;
2)制备移植含有甲基苯丙胺的粪便微生物;
3)取抗生素处理的大鼠,分成3组,每组雌雄各6只,采用灌胃针分别用不同甲基苯丙胺浓度粪便菌悬液进行灌胃,每次0.2mL,连续灌注7d;
4)接种后连续饲养21d,实验结束前称取每组大鼠的体重及采食量,用于计算甲基苯丙胺的浓度,并取大鼠粪便高通量测序分析。
5.如权利要求4所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中,所述制备移植含有甲基苯丙胺的粪便微生物的方法为:将新鲜粪便迅速悬浮于预还原处理过的无菌生理盐水中,漩涡混匀1//tn,静置1min,快速吸取上清,盛于1.5mL灭菌处理过的离心管中于-20℃保存用于菌群移植。
6.如权利要求5所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法,其特征在于,所述无菌生理盐水的使用量为:每克粪便加入4mL生理盐水,即稀释5倍。
7.一种应用如权利要求1~6任意一项所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型的构建方法构建的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型。
8.一种如权利要求7所述的用于甲基苯丙胺干预伪无菌大鼠模型在戒除甲基苯丙胺和肠道菌群研究中的应用。
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