[发明专利]一种纯化ARA毛油的方法

说明书

本发明属于发酵工程领域，涉及一种纯化ARA毛油的方法，具体地，本发明涉及一种纯化ARA毛油的方法，包括将ARA毛油进行水化、脱色和分子蒸馏的步骤。本发明的方法制备ARA，产量高，纯度高，并且有利于ARA的大规模工业化生产。

本发明是申请号为201710097797.5的母案的分案申请，该母案的申请日为2017年02月23日，发明名称为“一种利用微生物发酵生产ARA的方法”。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，涉及一种利用微生物发酵生产ARA的方法，具体地，涉及利用高山被孢霉菌株工业化发酵生产含花生四烯酸(ARA)混合油脂的方法。

背景技术

ARA，又称花生四烯酸，全名二十碳四烯酸(cis－5,8,11,14－arachidonic acid,ARA)，是ω－6系列的一种多元不饱和脂肪酸。ARA是一种人体重要的必需脂肪酸，也是人体中含量最高、分布最广的一种多不饱和脂肪酸。ARA在血液、肝脏、肌肉和其他器官系统中作为磷脂结合的结构脂类起重要作用，ARA是许多循环二十烷酸衍生物的直接前体。这些生物活性物质对脂质蛋白的代谢、血液流变学、血管弹性、白细胞功能和血小板激活等具有重要的调节作用。此外，有研究表明，ARA降血脂、降血压和降血胆固醇的效果均强于亚油酸和亚麻酸；同时能缓解氯化钡、乌头碱等引起的心律不齐，其作用效果也强于亚油酸和亚麻酸。因此，ARA具有重要的营养、保健和医疗功能。

目前，ARA主要由微生物发酵法生产。公开号为CN105112466A的专利公开了一种添加产物促进剂发酵制备花生四烯酸的方法，其所公开的添加产物促进剂的摇瓶在培养结束后检测发酵液中ARA含量为5.41g/L，产量较对照提高了45.1％。公开号为CN102925502A的专利公开了一种利用高山被孢霉生产花生四烯酸油脂的工业方法，其所公开的产量为花生四烯酸的单位产量达到10g/L发酵液。公开号为CN104278107A的专利公开了一种基于溶氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其所公开的产量为25m³发酵罐发酵高山被孢霉细胞干重、油脂含量、花生四烯酸占总油脂的百分含量、花生四烯酸的单位产量分别可以达到55g/L、54％、65％、20.628g/L，花生四烯酸生产强度达到1.753g/(L·d)，这也是目前报道的采用高山被孢霉大规模工业化生产ARA的最高生产水平。虽然其ARA生产率较之前的研究有了较大提高，但对于利用高山被孢霉进行工业化生产花生四烯酸，大大降低其生产成本，提高单位产量，使微生物发酵工业化生产ARA的方法能够得到大力推广和普及使用还是远远不够的。

现有从高山被孢霉发酵培养物中提取ARA的方法主要有三种，一是离心法，二是有机溶剂萃取法，三是超临界萃取法。离心法如公告号为CN1282745C的专利公开了一种从微生物细胞中获得油的方法，所述的油包含一种或多种不饱和脂肪酸，该方法包括：(a)裂解微生物细胞的细胞壁以释放出油来；和(b)通过离心从至少部分(a)中所形成的细胞壁碎片中分离油。但该发明离心后的油层品质较差，除含油脂外，还含有水分、培养基成分和细胞碎片，不利于后续的精炼，另外离心后的废水层含有大量菌渣，COD很高，难以处理或处理成本极高。有机溶剂萃取法如公告号为CN101109015B的专利公开了一种花生四烯酸油脂的制备方法，其中所述的油脂提取方法为：将老化后的菌体收集、烘干、磨碎，用石油醚和乙醇萃取12小时，再将石油醚和乙醇通过减压蒸馏除去即得到花生四烯酸油脂。但该方法使用到有机溶剂进行萃取，最终产品可能会有溶剂残留，且萃取过程存在易燃易爆等安全隐患。超临界萃取方法如公开号为CN101579019A的专利公开了一种用CO₂超临界萃取法提取多不饱和脂肪酸油脂的方法，其步骤如下：①粉碎过筛；②加温萃取；③将液态CO₂注入萃取釜中，加压；④萃取完毕收集油脂。但超临界设备价格昂贵，萃取收率也不高，该发明萃取出油率最高只有50％。