[发明专利]一种高含量青稞β-葡聚糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种高含量青稞β‑葡聚糖的制备方法，其制备青稞β‑葡聚糖的工艺具有工艺简单、操作方便、效率高等特点，通过青稞粉碎，除淀粉和蛋白，膜分离，分级醇沉，透析纯化后得到β‑葡聚糖，纯度高，分子量分布单一，理化性质稳定，为后续青稞高含量β‑葡聚糖的活性研究、使用后的酒体活性研究以及功能食品应用提供原料。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种绿衣观音土曲的生产方法。

背景技术

青稞(Hordeum vulgar L.var.nudumHook.f)属禾本科大麦属作物，又称之为裸大麦、米大麦、淮麦及元麦，主要分布在我国青海、西藏、四川的甘孜州、云南的迪庆、甘肃的甘南等地。青稞原料中β-葡聚糖的含量为4％-8％，研究发现，β-葡聚糖具有降血脂、降胆固醇、调节血糖、预防心血管疾病、提高免疫力、抗肿瘤等作用。青稞中β-葡聚糖的化学名称为：(1-3)(1-4)-β-D-葡聚糖,是一类非淀粉多糖,β-葡聚糖分子中β-(1，3)键的存在使葡聚糖可溶于水，β-(1,4)连接而难溶于水。此外，β-葡聚糖在酸和稀碱条件下也能溶解，麦粒体积大小、环境温度、体系pH值和离子强度等多种因素均会影响其溶解性。β-吡喃葡萄糖是其基本结构单位,这与纤维素相似,不同的是它是以β-(1→3)和β-(1→4)两种糖苷键连接而成。由β-(1→4)键连结形成许多纤维三糖和纤维四糖基,它们彼此间通过单独的β-(1→3)键相互连接成多聚体形式。1995年,Henriksson等分析证明了商品化β-葡聚糖(分子量250000)中(1→3)键连接占29％,(1→4)键连结占71％,一般认为(1→3)键和(1→4)键的比例在1：2.4或1:2.6左右。关于β-葡聚糖的分子量众说不一,差异很大,这主要与研究采用的原料和提取工艺有关。青稞β-葡聚糖在高纯度时呈白色无味，溶于水后形成中性粘稠溶液，在适当加热、非强酸强碱条件下都非常稳定，不溶于正丁醇、丙酮、乙醇等有机溶剂。

目前，高含量青稞β-葡聚糖的制备方法有醇沉、去蛋白、去色素、制备色谱纯化等工艺，均比较复杂，分离也比较困难，且提取过程容易造成β-葡聚糖的收率偏低。

发明内容

本发明的目的是提供一种方便直接、工艺简单、产品稳定、分子量分布单一、可作为多种研究及功能食品原料的高含量青稞β-葡聚糖的制备方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供的技术方案如下：

一种高含量青稞β-葡聚糖的制备方法，步骤如下：

(1)青稞粉碎：将青稞进行粉碎，过40-80目筛，制得青稞粉；

(2)除淀粉：在经步骤(1)加工后所得的青稞粉中加入料液比为1g:(5-80)mL的水，加碱液调整pH值至8-10，然后加入20U-2000U高温淀粉酶，混合均匀后于90-95℃条件下搅拌回流1-15h；

(3)除蛋白：调整步骤(2)所得的溶液的pH值至3-5，静置后蛋白沉淀析出，离心去除沉淀，制得提取液；

(4)除小分子多糖：将离心液使用5万-10万Da分子量的有机或无机超滤膜截留，收集透过液；

(5)分级醇沉：将上述透过液浓缩，再进行分级醇沉，醇沉浓度从低到高，收集沉淀，得青稞β-葡聚糖粗品；

(6)透析纯化：将所述青稞β-葡聚糖粗品加水复溶，然后通过8万-15万纤维素透析袋进行透析纯化，收集青稞β-葡聚糖纯品溶液；

(7)干燥：将所述青稞β-葡聚糖纯品溶液进行干燥，得到青稞β-葡聚糖纯品。

进一步地，步骤(5)中将透过液浓缩至1:3-1:6(生药比)的体积；醇沉浓度为40％-80％。

进一步地，步骤(7)中的干燥方式为带式真空、烘箱或冷冻中的任意一种。