[发明专利]基于高效液相色谱的低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法

说明书

本发明提供了一种基于高效液相色谱的低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，该指纹图谱检测方法包括以下步骤：取绿原酸配制对照品溶液，取低糖型强力枇杷露配制供试品溶液；其中，色谱条件包括：以甲醇和0.02mol/L磷酸氢二钾溶液为流动相分别将所述对照品溶液和供试品溶液过Agilent Eclipse Pluc C18色谱柱并进行梯度洗脱；本发明提供的低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法能够有效地对产品进行表征，有利于全面监控产品的质量，避免了低糖型强力枇杷露质量控制的单一性和片面性，减少了人为处理产品质量达标的可能性；本发明提供的低糖型强力枇杷露指纹图谱检测方法，所得指纹图谱的峰多，峰形好，易于鉴别，相似性高，准确可靠，30min即可完成检测。

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，特别涉及基于高效液相色谱的低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法。

背景技术

强力枇杷露包括枇杷叶、罂粟壳、白前、桑白皮、百部、桔梗和薄荷脑七味中药，为淡棕色澄清液体，具有养阴敛肺，镇咳祛痰的作用，常用语久咳劳嗽和支气管炎等，目前，强力枇杷露现行的指纹图谱检测方法不适用于低糖型强力枇杷露，由于糖份的变化，导致已知的指纹图图谱体系的系统适用性较差，很多峰受到干扰，还存在特征峰较少、分离度小、检测时间较长的问题，缺乏对产品质量的全面控制。

发明内容

为了解决以上技术问题，本发明提供了一种基于高效液相色谱的低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，所述指纹图谱检测方法包括以下步骤：

取绿原酸配制对照品溶液，取低糖型强力枇杷露配制供试品溶液；

其中，色谱条件包括：以甲醇和0.02mol/L磷酸氢二钾溶液为流动相分别将所述对照品溶液和供试品溶液过Agilent Eclipse Pluc C18色谱柱并进行梯度洗脱，并且在所述梯度洗脱的过程中控制所述甲醇的体积，使得所述甲醇的体积占所述流动相总量的百分比按照以下比例增加；

在梯度洗脱所述对照品和所述供试品时：

t＝0min-5min时，所述甲醇占所述流动相总体积的百分比为9％，所述0.02mol/L磷酸氢二钾溶液占所述流动相总体积的百分比为91％；

t＝5min-19min时，所述甲醇占所述流动相总体积的百分比为10％，所述0.02mol/L磷酸氢二钾溶液占所述流动相总体积的百分比为90％；

t＝19min-24min时，所述甲醇占所述流动相总体积的百分比为15％，所述0.02mol/L磷酸氢二钾溶液占所述流动相总体积的百分比为85％；

t＝24min-30min时，所述甲醇占所述流动相总体积的百分比为20％，所述0.02mol/L磷酸氢二钾溶液占所述流动相总体积的百分比为80％。

2.进一步地，该低糖型强力枇杷露包括枇杷叶、罂粟壳、百部、白前、桑白皮、桔梗和薄荷脑，制备方法如下：中药组合物除薄荷脑外，其余六味加水煎煮两次，加水量为以上六味中药总重量的8倍，每次2小时，合并煎液，滤过，浓缩，干燥，放入用于承载中药组合物的低糖型掩味载药系统，加热至沸，保持20分钟，静置滤过，加入薄荷脑，搅拌均匀，静置，滤过，混匀，即得低糖型强力枇杷露；

所述用于承载中药组合物的低糖型掩味载药系统主要由蔗糖、纳豆菌提取液、米提取液和水组成，各成分在水中的浓度为：蔗糖8-10g/ml、纳豆菌提取液4％-6％、米提取液2％-3％，所述中药组合物与所述低糖型掩味载药系统的质量比为15-20:80-120，所述纳豆菌提取液的制备方法如下：将纳豆菌活化后接种于液体培养基上，培养后，将菌悬液分离，收集上清液，过滤除菌，母液冻干即得纳豆菌提取物；

米提取液是将大米和紫米进行发酵制得，发酵方法如下：